基于手性离子液体的毛细管电泳技术在金鸡纳生物碱分离中的应用研究

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目的:本文研究了金鸡纳生物碱的提取和拆分方法,并且探讨了毛细管电泳中联用使用HP-β-CD和[TBA][L-ASP]作为添加剂试剂拆分4个金鸡纳生物碱(奎宁、奎尼丁、辛可宁、辛可宁丁)异构体的分离机理。最终建立了一种经济、快捷、有效、绿色环保的高效毛细管电泳方法,并成功的用于金鸡纳药材,奎宁注射液以及奎宁饮料中金鸡纳生物碱的含量测定。方法:(1)以有机试剂甲醇作为提取溶剂,利用超声萃取的方法对4个金鸡纳生物碱的提取方法首先进行研究。分别考察了超声频率、超声时间、提取温度、加入有机碱的体积等相关参数。最终获得了提取金鸡纳生物碱的最佳方法。(2)在压力进样,未涂层毛细管柱(75μm×57 cm)的高效毛细管电泳中联合使用HP-β-CD和[TBA][L-ASP]作为手性添加剂,醋酸铵作为背景电解质缓冲液对4个金鸡纳生物碱进行分离分析。并分别对背景电解质浓度、p H、HP-β-CD浓度、[TBA][L-ASP]浓度、分离电压及温度等相关参数进行考察,最终确定分离检测金鸡纳生物碱最优毛细管电泳条件为:40 m M HP-β-CD、p H 5.0、14 m M[TBA][L-ASP]、25 m M醋酸铵、检测波长235 nm、分离电压15 k V、柱温25℃。结果:(1)通过毛细管电泳检测发现,1.5g金鸡纳树皮药材粉末加入20m L甲醇和2m L氨水的混合溶液中,浸泡1h后在频率为70Hz,温度40℃条件下超声30min,4个金鸡纳生物碱的提取率最高。(2)在最优电泳分离检测条件下,测得奎宁、奎尼丁、辛可宁、辛可宁丁线性范围均为1~500μg/m L;R2分别为0.9975,0.9994,0.9990,0.9986;日内精密度RSD<4.0%,日间精密度RSD<4.1%。实际样品分析物的回收率范围为95.9%~102.9%,且4个样品出峰时间均小于7min。结论:为提高分析物在毛细管电泳手性分离分析方法中的灵敏度和重现性可以适当联合使用多种手性选择试剂用于手性分离。其中HP-β-CD与手性离子液体[TBA][L-ASP]联合使用同时作为毛细管电泳法分离生物碱的手性选择试剂时,可使分析方法更加简单、经济、有效。
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