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目的探讨formyl peptide receptor 1(FPR1)基因表达及富勒烯衍生物富勒烯聚乙氧基乙醇(F2)对小鼠和人类脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)和小鼠骨髓巨噬细胞(bone marrow macrophages,BMMs)分化的影响。方法1.提取C57BL/6野生基因型及FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞、骨髓巨噬细胞以及培养传代人脂肪干细胞。2.细胞处理:第一部分:FPR1基因表达及富勒烯衍生物F2对ADSCs成脂及成骨分化的影响以细胞培养基(DMEM)+10%胎牛血清(FBS)+100μg/ml混合抗生素(青霉素/链霉素,P/S)作为空白对照组,成脂分化诱导液(AM)或成骨分化诱导液(OM)作为阳性对照组,在阳性对照组基础上添加0.2μg/mL富勒烯衍生物F2作为处理组。第二部分:FPR1基因表达及富勒烯衍生物F2对BMMs分化的影响以RPMI 1640细胞培养基+10%胎牛血清(FBS)+100μg/ml混合抗生素(青霉素/链霉素,P/S)+20ng/ml MCSF作为空白对照组,在空白对照组基础上添加100ng/ml LPS或150ng/ml Rankl作为阳性对照组,在阳性对照组基础上添加0.2 μg/ml F2作为处理组,其中在加入LPS或Rankl前0.5小时加入F2。3.检测评估:第一部分:在细胞培养的不同时期,运用茜素红染色或油红O染色评估细胞矿化或脂滴形成情况,应用RT-PCR测定相应成骨或成脂基因的表达水平,使用WST-1试剂盒及结晶紫染色评估细胞数从而评估富勒烯衍生物F2的细胞毒性。第二部分:细胞接受刺激后,使用WST-1试剂盒评估细胞数从而评估富勒烯衍生物F2的细胞毒性,应用RT-PCR测定相关炎症基因或破骨基因的表达水平,应用亚硝酸盐试剂盒评估细胞产生的亚硝酸盐的量。结果1.FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞成脂分化能力高于C57BL/6野生基因型小鼠,成骨分化能力弱于C57BL/6野生基因型小鼠。2.与C57BL/6野生基因型小鼠相比,FPR1基因敲除小鼠骨髓原代巨噬细胞在LPS诱导后炎性表型增加,在破骨诱导后破骨基因表达也增加。3.富勒烯衍生物F2可以抑制脂肪干细胞的成脂过程中脂滴形成及成骨分化过程中细胞矿化。4.C57BL/6野生基因型小鼠骨髓原代巨噬细胞中富勒烯衍生物F2可以显著降低LPS诱导的促炎因子表达及NO产生,可以促进Rankl和MCSF诱导的破骨分化。结论1.FPR1基因表达可以促进小鼠脂肪干细胞成骨分化,抑制成脂分化,具体表现为抑制脂滴形成、促进矿化,成骨诱导后FPR1基因表达增加。2.富勒烯衍生物F2可以抑制脂肪干细胞成脂及成骨分化,具体表现为抑制脂滴形成及矿化。3.富勒烯衍生物F2可以抑制炎症反应,具体表现为减少ROS的产生及下调炎症因子的表达。还可以促进骨髓原代巨噬细胞的破骨分化,表现为破骨基因表达增加。4.FPR1基因表达可以抑制炎症发生并抑制骨髓巨噬细胞破骨分化,具体表现为FPR1基因缺失细胞在促炎诱导后炎性表型表达增加,在破骨诱导后破骨基因表达增加。