伴随着樱桃加工业的快速发展,加工副产物——樱桃籽造成的环境污染、资源浪费问题日益凸显,其深加工和综合利用引起重视。樱桃籽富含多种营养物质,其中蛋白质占其干重的30-40%,是生产抗氧化多肽的良好原料。本研究以樱桃籽蛋白为原料,应用生物技术、食品高新技术、分离纯化技术、现代仪器分析技术等先进技术,制备获得两种抗氧化能力较强的多肽,获得主要研究成果如下:1、以酶解产物的多肽得率和水解度为指标,确定了碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶法协同水解的复配工艺。通过单因素试验、Plackett-Burman试验、Box-Behnken设计响应面分析试验确定了最优酶解工艺参数为:料液比3.82%,加酶量4823 U/g,酶配比1:1,pH 7.5,温度48.77℃,时间128 min,在此工艺下获得的多肽得率为41.90%。2、采用超滤、葡聚糖凝胶过滤层析、半制备反相高效液相色谱对樱桃籽蛋白酶解产物进行分离纯化,通过对各分离组分的羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基、ABTS阳离子自由基清除能力的测定,得到了自由基清除能力较高的肽段F-IV-E(a)-4和F-IV-E(a)-5,其中在5 mg/mL的浓度下,E(a)-4具有较高的DPPH自由基清除率,同时E(a)-5具有较高的超氧阴离子自由基清除率。3、应用Q-TOF-MS和494蛋白质序列分析仪鉴定两条肽段F-IV-E(a)-4和F-IV-E(a)-5的相对分子量和氨基酸序列分别为731.92 Da[M+H]+(Phe-Pro-Glu-Leu-Leu-Ile)和520.61 Da[M+H]+(Val-Phe-Ala-Ala-Leu)。