研究背景：Netherton综合征(Netherton syndrome，NS)(OMIM ＃256500)又称为迂回线状鱼鳞病(ichthyosis linearis circumflexa)，是一种罕见的常染色体隐性遗传鱼鳞病。临床有三大特征：先天鱼鳞病样红皮病、竹节样毛发、特应性素质。NS致病基因为SPINK5基因，基因编码淋巴上皮Kazal型相关的抑制物（Lymphoepithelial kazal-type-related inhibitor，LEKTI）。LEKTI对参与角化桥粒断裂，使表皮脱落的缓激肽释放酶(kallikrein，KLK)5、7、14有阻遏作用。　　 NS虽然在临床具有三大特征，但因为是先天性疾病，所以在出生时的红皮病皮损很难和红皮病样银屑病、先天性红皮病样鱼鳞病等其它新生儿红皮病鉴别。因此具有一定的临床异质性。少数患儿会在这一阶段死于高钠脱水，其他的往往直到出现头发改变才被诊断。竹节发是NS的另一特征，毛发短、干燥、无光泽，毛发异常可随年龄增长而改变。Netherton(1958)首先报到了NS，同时也确定了竹节发是NS的临床特征。特应性素质是SPINK5基因具有遗传异质性地特征表现。NS患者一般都有荨麻疹、哮喘、枯草热、血管性水肿、特应性皮炎等表现。既往研究显示SPINK5基因6个编码改变的SNP与特应性皮炎相关，所以SPINK5基因也是特应性皮炎致病基因研究的候选基因。以上三大特征实际在临床不大可能会同时观察到，最具特征性还是患者具有的迂回线状皮损。一般患儿红皮病好转后，大约在二岁就会出现匐行性环状或多环状鳞屑性损害，上覆糠状鳞屑，此表型直到成人并持续终生。研究表明这种脱屑是与SPINK5基因编码的LEKTI功能紧密相关。　　 LEKTI为一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，有15个Kazal型丝氨酸肽酶抑制物结构域，在表皮、粘膜和胸腺表达，与表皮的屏障功能有关。15个Kazal型丝氨酸肽酶抑制物功能域可裂解为D1、D5、D6、D8-D11、D9-D15。LEKTI能抑制KLK的蛋白水解作用。　　 自Chavanas(2000)首先通过连锁分析和纯合子定位将NS致病基因定位在5q32，目前所报道的SPINK5的基因突变达到了47种。有缺失、插入所致移码突变；还有点突变的无义、错义突变，突变热点不确定。但是由于NS患者较少见，基因型与表型之间关系的还不能确定。有学者提出NS临床表型的严重度是与LEKTI相关的。在表皮LEKTI结构域被检测到越少，临床症状就越严重，甚至死亡。NS的鳞屑表现是由于KLK亢进引起，而LEKTI能阻遏其上调。部分LEKTI结构域的功能已在表皮证实，D8-D11对KLK5作用最强，而KLK5在表皮脱落过程起关键作用。目前SPINK5基因编码LEKTI各结构域序列已清楚，因此一般认为SPINK5基因突变发生的部位越上游，LEKTI蛋白表达也就越少，表型也越重。但是由于从基因到临床表现并不是简单的翻译表达的过程，还有基因调控、修饰及环境等因素；并且由于NS是一罕见的常染色体隐性遗传病，临床样本也较少，故结论还不能肯定。　　 因此我们收集了两例在二个不同家系患者，对其进行基因诊断，并予免疫组化证实。以期：(1)发现NS新的致病突变，为明确基因型与表型之间的关系提供资料;(2)建立准确、快速的NS诊断方法；(3)同时也为今后NS的遗传咨询、产前诊断奠定基础。　　 目的：对两例在二个不同NS家系患者进行基因突变、免疫组化检测，探讨该病基因型与表型之间的关系；建立准确、快速的NS诊断方法。　　 方法：1．提取两例患者和100名正常对照的外周血白细胞基因组DNA，采取聚合酶链反应(PCR)扩增基因的全部编码序列，然后通过DNA直接测序确定基因突变位点和类型。2．对患者和正常对照皮损切取后免疫组化，采用LEKTI抗体观察LEKTI有无表达。　　 结果：SPINK5基因DNA测序发现：患者Ⅰ有二个杂合突变，其中一个错义突变(c.316G＞A)是SNP，另一个为无义突变(c.724G＞T)。患者Ⅱ有一纯合缺失(c2474delAG)。免疫组化证实在两患者表皮颗粒层和棘层上部均无LEKTI蛋白表达。　　 结论：我们通过直接测序和免疫组化确诊了两例临床NS患者；两例患者c．724G＞T、c2474delAG为二个尚未报道的新突变；患者Ⅰ具有竹节发且周期性脱皮，相较患者Ⅱ却无以上表型，患者I发生．SPINK5基因突变的位置较患者Ⅱ上游。因而本研究的两NS患者基因型与表型关系符合文献观点；虽然患者Ⅰ表皮无LEKTI蛋白表达，但SNPc．316G＞A是否确实为致病突变需排除其它原因。