肝星状细胞与肝癌HepG2细胞相互作用的实验研究

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目的:  通过肝星状细胞和肝癌细胞共培养,观察两者的相互作用和对彼此生长状态的影响,进一步探讨肝星状细胞在肝癌发展过程中的作用,以期为肝癌治疗提供新思路。  方法:  以人肝癌HepG2细胞系和肝星状细胞HSC-T6细胞系为研究材料,实验包括以下内容:  1.HepG2细胞条件培养基的制备及CCK-8法检测HepG2细胞条件培养基对HSC-T6增殖的影响;  2.HSC-T6细胞条件培养基的制备及CCK-8检测HSC-T6细胞条件培养基对HepG2增殖的影响;  3.HSC-T6和HepG2细胞共培养及电镜观察两者超微结构的改变;  4.HSC-T6和HepG2细胞共培养及免疫组织化学法检测两者Syndecan1的表达改变。  结果:  1.CCK-8法结果显示:HSC-T6的增殖均受不同浓度、不同时间的HepG2细胞条件培养基影响,且呈正相关的关系。各实验组与对照组相比,HepG2细胞条件培养基促HSC-T6增殖作用显著(P<0.05);  2.CCK-8法结果显示:HepG2的增殖均受不同浓度、不同时间的HSC-T6细胞条件培养基影响,且呈正相关的关系。各实验组与对照组相比,HSC-T6细胞条件培养基促HepG2增殖作用显著(P<0.05);  3.电镜观察发现,HSC-T6和HepG2细胞直接共培养时,两者均呈增殖活跃的超微结构表现。与单独培养的HSC-T6相比,共培养的HSC-T6最明显的结构改变为胞浆内粗面内质网明显扩张;  4.免疫组化结果显示,单独培养的HSC-T6或HepG2细胞,其Syndecan1均呈阳性表达。而两者共同培养时,两者的Syndecan1表达均增强。  结论:  人肝癌HepG2细胞能诱导肝星状细胞活化、增殖。肝星状细胞也可刺激HepG2细胞增殖。两者相互作用在肝癌的进展中可能起重要作用,进一步提示改善肿瘤微环境可能在肿瘤治疗中起积极作用。
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