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目的F1F0-ATP(合成)酶是一种广泛分布于各种组织细胞内的酶复合体,是线粒体氧化磷酸化体系的重要组成部分,主要在细胞内或细胞膜发挥合成或水解ATP的功能。本研究着眼于F1F0-ATP(合成)酶在角质形成细胞分化过程中表达的变化,及其可能发挥的作用。为进一步研究角质形成细胞分化与细胞内外ATP水平及能量代谢的关系奠定基础。方法1、采用免疫组化方法检测和比较分析了正常皮肤、银屑病、角化棘皮瘤、皮肤鳞癌皮损中F1F0-ATP(合成)酶β亚基(ATP5B)的表达模式；2、在建立体外培养密度依赖的HaCaT细胞分化模型基础上,用免疫印迹、免疫荧光和RT-PCR的方法检测F1F0-ATP(合成)酶p亚基(ATP5B)表达的变化；3、应用ATP荧光定量检测方法检测了F1F0-ATP(合成)酶小分子抑制剂——寡霉素和白皮杉醇,对于HaCaT细胞内外ATP水平的影响,并用免疫印迹方法检测了其对于HaCaT细胞分化标志(involucrin)的影响。结果1、在正常皮肤、银屑病皮损和角化棘皮瘤中, ATP5B随表皮分化而表达增高；在银屑病皮损和角化棘皮瘤中ATP5B较正常皮肤表达下降；鳞癌癌灶中ATP5B较周边相对正常皮肤表达下降；2、建立了体外培养的密度依赖的HaCaT细胞分化模型,在mRNA水平和蛋白水平验证了分化指标的表达随培养时间延长而增加；3、在密度依赖的HaCaT分化模型中,ATP5B在mRNA水平上,第6d和第8d可见显著上调(p<0.05),在蛋白水平上未见明显改变(p>0.05)；4、常规培养状态下,寡霉素可降低HaCaT细胞内ATP的水平和involucrin蛋白表达水平；白皮杉醇主要降低HaCaT细胞外ATP的水平,对胞内ATP水平和involucrin蛋白表达水平无明显抑制作用；5、在密度依赖的分化模型中,白皮杉醇可显著降低分化模型后期细胞内ATP的水平和involucrin的蛋白表达水平(p<0.05)。结论1、F1F0-ATP(合成)酶可能随着角质形成细胞的分化而表达增高,在银屑病等几类常见表皮增殖性疾病皮损中表达下调。2、F1F0-ATP(合成)酶抑制剂可以抑制HaCaT细胞的分化,并且其作用可能与细胞内ATP水平的下调有关。