背景：越来越多的统计数据表明，随着环境污染等因素的影响，近几年的实体肿瘤发生率出现升高趋势，已经逐步成为影响着人类健康的重大疾患之一。就治疗方式的选择而言，目前对于多数实体肿瘤而言，其主要的首选治疗方式仍然是早期的手术治疗，化疗和放疗一般往往被用作辅助或保守治疗的手段，生物治疗和中医中药治疗也逐步体现出了重要的辅助或支持治疗作用。然而，国内外多数学者的研究结果表明，无论是化学治疗抑或是放射治疗，它们往往会引起免疫抑制，血小板减少，甚至出血等比较严重的毒副作用。随后出现的药物耐药现象和复发问题，也成为制约其疗效质量的重要原因。因此，针对目前放、化疗存在的问题，无论是国外学者或者国内学者，都在积极的探讨新型的药物制剂、创新技术，或者是优化化疗方案。越来越多的报道表明，中枢神经系统也是肿瘤发生的常见部位，其中脑胶质瘤是具有较高发生率的类型，就其临床特点而言，主要表现为较高的恶性程度，较强的侵袭性和比较容易复发等特点，至于其治疗效果，总体治疗效果并不理想。随着外科手术方案的改进，以及影像技术和设备的支撑水平提升，多数手术治疗的效果得到了明显的提升，但是其总体的治疗效果仍然不能得到理想的目标。除了传统的手术治疗以外，放射治疗、化疗或生物治疗的水平也得到了长足的发展，为脑胶质瘤患者生存质量的提高提供了重要手段。但是，化疗药物很难透过血脑屏障，并容易发生耐药现象，因此限制了化疗的治疗效果，甚至部分学者认为脑胶质瘤术后辅以化疗对于手术后的生存率无明显影响。但是，就多数文献报道的结果来看，手术后给予合理的放、化疗联合治疗，可以延长病人的生存期。对于脑胶质瘤的病人，考虑到中枢神经系统血脑屏障的特殊性，应该考虑选择小分子、脂溶性高、非离子化、对正常脑组织毒性小的药物，同时采用有效的给药途径。另外，具有不同作用机制的化疗药物，或者化疗与生物治疗药物等的联合治疗方案，已经成为脑胶质瘤等肿瘤治疗的有效方式之一，它们的联合往往会产生疗效提高和毒性减少的效果。近几年的研究发现，脑胶质瘤的发生和发展也与表观遗传学的异常改变有关，例如DNA或组蛋白的甲基化、组蛋白的乙酰化、磷酸化等。因此，有关表观遗传调控的关键酶等，成为肿瘤治疗的重要途径之一。该研究则主要在预实验基础上，根据药物作用的半数增殖剂量，选择一定浓度的TSA(HDAC抑制因子，曲古霉素A)作为候选实验药物浓度，在体外重点观察其对脑胶质瘤细胞株的增值抑制和凋亡诱导作用，并分析其作用的分子机制。随着研究的深入，进一步阐明miRNA的表达，功能和调控机制将为脑胶质瘤治疗提供更有效的治疗策略。下一步我们将在临床上系统探讨miRNA与脑胶质瘤之间的关系，以及在临床应用方面的潜力和价值。
　　目的：主要探讨TSA是否具有抑制脑胶质瘤U251细胞增殖的作用，以及该种抑制作用是否通过诱导目的细胞的周期变化和凋亡发生而实现。并同时分析TSA抗脑胶质瘤U251细胞增殖作用的具体分子机制。
　　方法：采用CCK8法检测TSA对U251细胞增殖的影响；流式细胞术检测U251细胞的凋亡水平；RT-PCR方法检测凋亡相关基因caspase-3、caspase-9、bcl-2和baxmRNA表达水平变化。Westernblot检测bcl-2和bax蛋白表达。在高通量芯片测定、信息学分析、靶基因预测等预实验基础上，重点采用Luciferase实验测定miRNA-4298对PADI4的启动子结合与活性调控作用，揭示两者之间的靶向调控关系，并深入研究这种靶向调控作用是否参与细胞凋亡的发生过程。
　　结果：HDAC抑制因子TSA对U251细胞具有明显的增殖抑制作用，并呈现剂量和时间依赖性；药物作用后U251细胞以早期凋亡为主；bcl-2mRNA表达水平呈下降，baxmRNA表达水平上升，下游活化Caspase-3和Caspase-9基因表达上升；TSA可上调bax蛋白和下调bcl-2蛋白的表达，bcl-2/bax比值降低。进一步深入研究凋亡发生的上游通路，发现miRNA-4298对PADI4具有靶向结合和表达调控作用。无论是miRNA-4298或靶基因PADI4的表达变化均参与凋亡的诱导过程。
　　结论：研究结果表明HDAC抑制因子TSA对U251细胞的增殖抑制作用主要与细胞的凋亡诱导有关。在分子机制方面，初步证实miRNA-4298通过靶向调控PADI4的表达，继而降低bcl-2/bax比值，最终活化caspase-3/-9而启动U251细胞的凋亡过程。研究结果初步表明该药具有抗脑胶质瘤的潜在应用价值。