油茶组培再生体系建立及愈伤组织诱导

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本文以油茶幼嫩带腋芽茎段为外植体,对腋芽诱导、芽苗增殖、壮苗和生根等方面进行了研究,初步建立了油茶植株的完整再生体系。在愈伤组织诱导和分化的研究中,较为系统的探索了油茶叶片、叶柄、茎段三种外植体诱导愈伤组织和愈伤组织再分化的最佳激素组合,以及叶片诱导愈伤组织过程中抑制褐变的较佳处理。主要结果如下:(1)外植体消毒:春季3-5月采集幼嫩枝条作为外植体。启动茎段腋芽萌发实验中,以0.1%升汞消毒8min,腋芽启动率最高,可达64.0%;愈伤组织诱导中,叶片、叶柄、节间茎段分别以2%的次氯酸钠消毒21min.21min.24min效果较好,愈伤组织诱导率可分别高达73.6%、82.6%和67.3%。(2)带腋芽茎段的初代培养:油茶带腋芽茎段的最佳启动培养基为MS+TDZ(0.5mg/L)+NAA(0.5mg/L),芽启动率可达64.5%,平均芽长为1.6cm。(3)芽苗的增殖培养:芽苗增殖培养基为MS+6-BA(3.0mg/L)+NAA(0.05 mg/L)时,芽增殖倍数可达2.55倍,有效芽率为0.74。(4)壮苗与生根培养:本试验设计的活性炭浓度在壮苗培养没有明显促进作用;1/2MS+NAA(2.0mg/L)+蔗糖(20g/L)能促进有效芽生根形成完整植株。(5)外植体愈伤组织诱导:叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6.BA (2.0mg/L)+2,4-D(0.5mg/L),诱导率达74.5%;叶柄诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA(2.0mg/L)+2,4-D(2.0mg/L),诱导率达77.8%;茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA(4.Omg/L)+2,4-D(2.0mg/L),诱导率达67.8%。低温预处理7d,能较好的抑制叶片愈伤组织褐化。(6)愈伤组织增殖分化:愈伤组织在增殖培养基MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2mg/L NAA中能较好地增殖,并分化一些根。分化培养基配方有待进一步研究。
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