目的：重组IFRG蛋白对研究干扰素在哺乳动物胚胎发育中的作用具有重要意义,本次论文从发情期的兔子卵巢中扩增出IFRG基因,构建兔IFRG基因的原核表达载体,并将其转入E. coliBL21（DE3）中进行IFRG重组蛋白的表达。通过RT-PCR初步分析IFRG基因在兔七种不同组织中的表达情况。方法：1.取发情期兔子的新鲜卵巢,用总RNA提取试剂盒提取总RNA,经逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）法从兔卵巢中扩增出IFRG基因。2.用总RNA提取试剂盒提取兔一心、肝、脾、肺、卵巢、脑、肾等七种组织的总RNA,同时进行RT-PCR反应。3.使用TA克隆方法,将IFRG基因与pGEM-T载体进行连接并转化DH5α细胞,构建pGEM-T/IFRG重组质粒。经蓝白斑筛选后,抽提质粒进行双酶切鉴定和测序鉴定。4.将测序正确的pGEM-T/IFRG重组质粒用EcoRl和Xhol双酶切,将所得IFRG片段与同样经过EcoRl和Xhol双酶切的原核表达载体pET-41（c）连接,转化E.coli BL-21,构建pET-41（c）-IFRG重组质粒。随机挑选菌落,抽提质粒进行PCR鉴定和双酶切鉴定。用IPTG诱导促进IFRG融合蛋白的表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳检测。结果：1.将兔卵巢细胞中IFRG基因的PCR产物进行1.2%琼脂糖凝胶电泳,产物为一清晰条带,大小约为416bp。2.兔心、肝、脾、肺、卵巢、脑、肾等七种不同组织的RT-PCR反应结果经电泳检测显示IFRG基因在七种组织中有不同程度的表达。3.对pGEM-T/IFRG和pET-41（c）-IFRG进行PCR鉴定、酶切鉴定及DNA测序鉴定。PCR鉴定和酶切鉴都表明IFRG cDNA为416bp的DNA片段。测序结果与文献报道的IFRG基因序列有99.7%的一致性,证实pGEM-T/IFRG和pET-41（c）-IFRG重组质粒构建成功。4.将重组质粒转化入E.coliBL21（DE3）中,表达产物在SDS-PAGE上表现为相对分子质量（Relative molecular mass, Mr）约为41KD左右的融合蛋白,与预期的结果相符。结论：1.本实验克隆的基因为IFRG基因。2. RT-PCR分析结果显示,IFRG基因在兔心、肝、脾、肺、卵巢、脑、肾等七种不同组织中有不同程度的表达,在心、肝、卵巢中的表达量高,在脾和脑中的表达量较低。3.重组质粒pET-41（c）-IFRG是具有表达功能的原核表达系统。4. pET-41（c）-IFRG转化E.coliBL21（DE3）,其表达产物是IFRG融合蛋白。