产气荚膜梭菌是一种重要的人畜共患病的病原体,广泛存在于土壤、水源及人和动物肠道中。根据产气荚膜梭菌产生的四种主要致死性毒素(α、β、ε、ι毒素)可将产气荚膜梭菌分为A、B、C、D、E五种型。产气荚膜梭菌的经典分型方法,通常采用动物中和试验,但该方法操作繁琐、费时、代价高,而且有时结果不准确。本室文其乙等建立了一系列的多重PCR方法用于产气荚膜梭菌的基因分型、亚基因分型和肠毒素阳性产气荚膜梭菌cpe基因的定位。本研究利用标准菌株和本实验室保存的菌株对该方法进行了验证,同时以动物体内中和试验为对照。验证结果表明:多重PCR方法对标准菌株基因分型时,其结果与小鼠体内中和试验的结果一致,而且具有操作简便、快速的优点;产气荚膜梭菌的亚基因分型PCR方法除可以对该菌基因分型外,还可以评价该菌的致病性:对CPE阳性A型产气荚膜梭菌的cpe基因定位的多重PCR方法,可以快速准确地区分出染色体型cpe基因、cpe-IS1151型质粒cpe基因和cpe-IS1470-1ike型质粒cpe基因。 在此基础上,本研究对人畜体内的产气荚膜梭菌的分布进行了初步的调查。本研究首先采集样品,分离产气荚膜梭菌,并用生化反应试验和多重PCR方法鉴定了分离的产气荚膜梭菌。在对1311份人畜粪便样品检测时,分离鉴定出了511株产气荚膜梭菌,其中24株为C型产气荚膜梭菌,其余均为A型产气荚膜梭菌。从人的腹泻样品中分离到一株CPE阳性A型产气荚膜梭菌,经多重PCR方法鉴定,该CPE阳性分离株为染色体型CPE阳性A型产气荚膜梭菌。本次实验没有检测到B、D、E型产气荚膜梭菌。