第一部分NCX1在人胃癌组织及胃癌细胞系中的表达变化目的:观察NCX1在人胃癌组织及癌旁组织以及胃癌细胞系与胃黏膜上皮细胞中的蛋白表达变化。方法:采用免疫组化技术检测NCX1在人胃癌组织及癌旁组织中的蛋白表达差异,并与临床病理特征以及患者的生存预后进行相关性分析;Western blot技术检测NCX1在人胃癌组织及癌旁组织、胃癌细胞系及胃黏膜上皮细胞GES-1中的蛋白表达差异。结果:免疫组化实验发现NCX1在人胃癌组织中的蛋白表达水平高于癌旁组织,高表达NCX1的胃癌患者肿瘤较大,生存时间较短,预后较差;Western blot实验结果表明NCX1在人胃癌组织中的蛋白表达水平高于癌旁组织,同时也表明NCX1在人胃癌细胞系中的蛋白表达水平高于胃黏膜上皮细胞GES-1。结论:NCX1在人胃癌组织及胃癌细胞系中高表达,提示其在胃癌的发生发展过程中可能是一个促癌分子。第二部分NCX1对胃癌细胞增殖的影响目的:研究NCX1对胃癌细胞增殖的影响。方法:CCK-8实验检测不同浓度、不同时间Ca²⁺刺激对胃癌细胞MKN-45、SGC-7901、AGS及胃黏膜上皮细胞GES-1增殖的影响（筛选合适的刺激浓度及时间点）,并用NCX1的反向抑制剂KB-R7943阻断后加Ca²⁺刺激,观察其对胃癌细胞增殖的影响;Western blot检测不同时间的Ca²⁺刺激对胃癌细胞MKN-45、SGC-7901、AGS及胃黏膜上皮细胞GES-1中NCX1蛋白表达的影响,应用KB-R7943阻断后加Ca²⁺刺激,检测其对NCX1蛋白表达的影响;慢病毒稳定干扰NCX1的基因表达后再次检测。结果:CCK-8实验结果显示Ca²⁺呈浓度依赖性和时间依赖性地促进胃癌细胞MKN-45、SGC-7901、AGS的增殖,且其能够被NCX1的反向抑制剂KB-R7943所抑制,而Ca²⁺对胃黏膜上皮细胞GES-1的增殖无明显影响;慢病毒干扰NCX1基因表达后,胃癌细胞MKN-45、SGC-7901、AGS本身的增殖能力显著受到抑制,也能够抑制Ca²⁺刺激引起的胃癌细胞增殖;Ca²⁺呈时间依赖性促进胃癌细胞MKN-45、SGC-7901、AGS中NCX1的蛋白表达,KB-R7943可以抑制Ca²⁺上调的NCX1的表达,而Ca²⁺对GES-1细胞中NCX1的蛋白表达无明显影响;将NCX1干扰后,也可显著抑制MKN-45细胞Ca²⁺上调的NCX1的表达。结论:Ca²⁺通过促进NCX1的蛋白表达激动NCX1,NCX1活化后促进胃癌细胞的增殖。第三部分NCX1促进胃癌细胞增殖的分子机制目的:研究NCX1对胃癌细胞内Ca²⁺的调节作用及其促进胃癌细胞增殖的分子机制。方法:采用单细胞Ca²⁺成像系统观察细胞外0 Na⁺时胃癌细胞MKN-45、AGS细胞内Ca²⁺信号的变化,NCX1的抑制剂KB-R7943阻断后再用0 Na⁺刺激,观察细胞内Ca²⁺信号的变化;Western blot检测不同时间Ca²⁺刺激对胃癌细胞MKN-45、AGS中AKT及-catenin蛋白磷酸化表达的影响,应用KB-R7943阻断后加Ca²⁺刺激,再次观察其对AKT（Ser473）及-catenin（Ser675）蛋白表达的影响;慢病毒稳定干扰NCX1的基因表达后再次检测。结果:细胞外0 Na⁺能够激活胃癌细胞MKN-45、AGS中NCX1的外钙进入模式,从而检测到细胞内Ca²⁺信号的增加,并能够被NCX1的反向抑制剂KB-R7943阻断;Ca²⁺呈时间依赖性促进胃癌细胞MKN-45、AGS中AKT及-catenin蛋白磷酸化的表达,并能够被KB-R7943和shNCX1所抑制。结论:NCX1在胃癌细胞内有功能表达,能够促进外钙的内流,进而活化AKT（Ser473）,增强β-catenin（Ser675）的表达,最终促进了胃癌细胞的增殖。