丁香酚体内外抗氧化作用及其机制研究

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丁香酚是丁香挥发精油的主要成分,目前对丁香酚的报道多见于其抑菌能力、对鱼类的麻醉作用,其在机体内抗氧化活性、对活细胞的抗氧化活性方面的研究鲜有报道。实验通过对丁香酚体外抗氧化能力的测定、对急性肝损伤小鼠的保护作用以及对细胞氧化损伤保护作用的研究,综合探讨丁香酚抗氧化活性及作用机制,旨在为丁香酚在食品添加剂和功能性食品中的应用提供一定的理论参考。通过对丁香酚还原能力、清除羟自由基能力、清除超氧阴离子自由基能力、清除DPPH能力和抗脂质氧化能力的测定,实验结果表明,100~250μg/mL各浓度下丁香酚的还原能力高于BHT(P<0.05);丁香酚对·OH自由基IC50剂量为152.52μg/mL,低于BHT;250μg/mL的丁香酚对DPPH的清除率达到92.5%,显著高于BHT(P<0.05);对O2-·的IC50为215.99μg/mL;50~200μg/mL范围各浓度下丁香酚与Vc对卵黄脂蛋白体系氧化抑制作用差异不显著(P>0.05),250μg/mL浓度下丁香酚对卵黄脂蛋白体系氧化抑制作用显著高于Vc(P<0.05)。50~250μg/mL浓度范围内丁香酚的各项抗氧化指标均随浓度的增加而增大,差异显著(P<0.05)。采用CCl4作用于健康Balb/c小鼠建立急性肝损伤模型:测定实验小鼠肝指数;血清AST、ALT酶活力;肝脏匀浆T-AOC能力、MDA含量、SOD酶活力、CAT酶活力、GSH-Px酶活力;肝组织做切片,并在显微镜下观察病理学变化。结果表明,丁香酚各剂量组不同程度地抑制了CCl4致肝损伤导致的血清AST、ALT活性的升高,对CCl4引起的肝脏T-AOC能力降低、SOD、GSH-Px、CAT活力下降具有拮抗作用,10mg/(kg·d)和15mg/(kg·d)组各项指标与模型组差异显著(P<0.01),小鼠肝脏病理学显微镜检验结果表明丁香酚5mg/(kg·d)、10mg/(kg·d)和15mg/(kg·d)的给药量对小鼠肝脏结构、细胞完整性均具有保护作用,15mg/(kg·d)的给药量对小鼠肝脏的保护效果最好。采用H2O2诱导建立人肝细胞HL7702氧化损伤模型,测定丁香酚对细胞增值的影响、细胞抗氧化酶活性、细胞裂解液丙二醛的含量,结果表明10mmol/L的丁香酚对细胞的增值最为有利,0.1~10mg/L的丁香酚可显著提高H2O2损伤HL7702细胞的SOD、CAT、GSH-Px酶活性(P<0.05),并降低细胞裂解液MDA含量(P<0.05)。
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