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背景与目的化疗与表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor- tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)联合应用治疗晚期非小细胞肺癌产生协同增效作用与给药时序有关。既往研究显示二者同时及先吉非替尼后化疗相互作用与细胞周期关系密切,但化疗序贯吉非替尼增效作用的机制仍不明确。本研究通过观察多西他赛与吉非替尼不同时序应用对人肺腺癌SPC-A1细胞生长的影响及对EGFR及其信号蛋白ERK、AKT和胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor, IGF)1型受体(IGF-1R)表达及磷酸化的作用,探索二者序贯用药增效的可能细胞学机制。方法qPCR-HRM法检测细胞EGFR和K-ras基因突变;MTT显色分光光度法检测细胞增殖; Western blotting技术检测细胞EGFR、ERK、AKT、IGF-1R表达及磷酸化。结果SPC-A1细胞EGFR和K-ras基因无突变;与单药多西他赛或吉非替尼比,多西他赛与吉非替尼同时应用及先吉非替尼后序贯多西他赛对细胞生长抑制作用无显著差异,先多西他赛后序贯吉非替尼对其生长抑制作用显著增强。多西他赛和吉非替尼分别增强和抑制EGFR和ERK磷酸化。多西他赛诱导的EGFR和ERK磷酸化显著被序贯应用的吉非替尼抑制,但不能被同时应用的吉非替尼抑制。吉非替尼抑制EGFR和ERK磷酸化作用不能被同时或序贯应用的多西他赛逆转。多西他赛与吉非替尼不同时序应用对AKT及其磷酸化均无明显影响。多西他赛下调IGF-1R表达,吉非替尼对IGF-1R表达无明显影响。相比多西他赛,多西他赛序贯吉非替尼对IGF-1R表达无明显影响。结论多西他赛序贯吉非替尼对EGFR野生型的肺腺癌细胞SPC-A1生长抑制作用显著增强,其机制可能与影响细胞EGFR和ERK磷酸化有关,与AKT磷酸化及IGF-1R表达无关。