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目的:盆腔的正常结构和功能有赖于盆底支持组织的正常,胶原和弹性蛋白作为结缔组织的主要成分起着重要的作用,赖氨酰氧化酶(LOX)作为胶原和弹性蛋白交联的关键酶对于盆腔器官的支持也起着重要的作用。胶原的异常和或赖氨酰氧化酶的异常可能导致盆腔器官脱垂(POP)的发生。本研究通过检测POP患者主韧带和阴道前壁中LOX、Ⅰ型胶原蛋白的表达情况,探讨二者在盆腔器官脱垂发生发展中的作用。
方法:免疫组织化学染色,按链霉素抗生物素蛋白—过氧化物酶(S-P)法行免疫组织化学染色。切片常规脱蜡,胃蛋白酶室温下抗原修复15分钟,一抗4℃孵育过夜,DAB显色,苏木素复染。用PBS代替一抗作为阴性对照;采用免疫组化半定量法,每张切片随机选取5个高倍视野(×400)计数着色强度和染色面积评分(3人单独计数),染色程度:不着色记为0分,淡黄色记为1分,黄色记为2分,棕黄色记为3分。染色面积的百分数:无染色面积为0分,≤20%为1分,20%—40%为2分,染色面积介于40%—65%为3分,染色面积≥65%为4分。将两评分相乘所得的总分数作为加权染色强度,0~2分为阴性(-);2~4分为弱阳性(+);4~6分为阳性(++);6~12分为强阳性(+++);所有数据资料的统计采用SPSS13.0软件进行处理。
结果:⑴LOX主要表达于主韧带、阴道前壁的细胞外基质中,呈黄色或黄褐色,弥漫性或灶性分布。LOX在POP患者未绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为29.6%、22.2%,而在POP患者绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为46.3%、41.5%;LOX在对照组未绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为66.7%、73.9%,而在对照绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为73.9%、69.6%。统计学分析显示LOX在POP患者未绝经组和对照组未绝经组主韧带、阴道前壁中的表达差异具有显著性(x2=4.659,P<0.05;x2=4.200,P<0.05);LOX在POP患者绝经组和对照组绝经组主韧带、阴道前壁中的表达差异也具有显著性(x2=4.551,P<0.05;x2=5.401,P<0.05)。⑵Ⅰ型胶原蛋白表达呈黄褐色或棕褐色,弥漫性或灶性分布,主要位于细胞外基质中。Ⅰ型胶原蛋白在POP患者未绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为33.3%、25.9%,而在POP患者绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为39.0%、34.1%;Ⅰ型胶原蛋白在对照组未绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为66.7%、65.2%,而在对照组绝经组主韧带、阴道前壁中的阳性表达率为65.9%、73.9%。统计学分析显示Ⅰ型胶原蛋白在POP患者未绝经组和对照组未绝经组主韧带、阴道前壁中的表达差异具有显著性(x2=4.325,P<0.05;x2=4.747,P<0.05);Ⅰ型胶原蛋白在POP患者绝经组和对照组绝经组主韧带、阴道前壁中的表达差异也具有显著性(x2=4.047,P<0.05;x2=9.329,P<0.05)。⑶对POP组进行相关性分析显示,POP患者未绝经组主韧带、阴道前壁中LOX和Ⅰ型胶原蛋白表达有相关性(rs=0.606,P<0.01;rs=0.580,P<0.01);POP患者绝经组主韧带、阴道前壁中LOX和Ⅰ型胶原蛋白表达也有相关性(rs=0.341,P<0.05;rs=0.371,P<0.05)。统计学分析提示LOX和Ⅰ型胶原蛋白在POP患者主韧带和阴道前壁中的表达存在正相关。
结论:①POP患者主韧带、阴道前壁中LOX的表达减少在POP的发病中可能起着一定的作用。②Ⅰ型胶原蛋白在POP患者主韧带、阴道前壁中的表达减少可能促进了POP的发生。③LOX和Ⅰ型胶原蛋白在POP患者主韧带、阴道前壁中的表达改变具有正相关性,提示可能是二者相互作用促进了POP的发生发展。