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目的 对SD大鼠角膜碱烧伤后行羊膜移植,分别检测碱烧伤及羊膜移植术后角膜上致炎性细胞因子的表达水平,探讨角膜碱烧伤的损伤机制及羊膜的抗炎和免疫调节机制。 方法 70只SD大鼠,以0.5mol/L的氢氧化钠碱烧伤右眼制作成碱烧伤模型,随机分组,A组(n=32只)为碱烧伤后未行羊膜移植的烧伤对照组,B组为烧伤后立即施行羊膜移植的羊膜移植组(n=32只),另有6只大鼠作为正常对照组即C组(n=6只),术后第1、4、7、10天除死动物,分别在裂隙灯显微镜下对角膜混浊度、角膜新生血管及角膜上皮缺损进行临床评分,取下角膜,分别行苏木素/伊红染色(HE);免疫印迹试验(Western Blotting)定性检查致炎性细胞因子IL-1α(interleukin-1α)、IL-6(interleukin-6)和IL-8(interleukin-8)的表达;酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)定量检测上述致炎性细胞因子的表达水平;逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测IL-1α的mRNA的表达。 结果 羊膜移植组角膜上皮缺损、新生血管及角膜混浊度评分4、7、10天明显低于对照组,角膜组织中多形核白细胞(polymorphonuclear leukocytes,PMNs)浸润也减轻。在正常角膜中有IL-1α和IL-8的表达,而没有IL-6的表达,碱烧伤后IL-1α,IL-6和IL-8均显著表达,IL-1α于烧伤后第4天达到高峰,IL-6和IL-8于第7天达到高峰。羊膜移植组与烧伤对照组比较,羊膜移植组于术后第1、4天能显著降低IL-1α(p<0.01)及其mRNA的表达水平,第4、7天能显著降低IL-6及IL-8的表达水平(p<0.01)。 结论 角膜碱烧伤后早期致炎性细胞因子的过量表达直接关系到急性期角膜炎症,并可能通过激活免疫系统,参与随后的免疫反应,介导免疫损伤。新鲜羊膜