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目的：(1)研究Hedgehog信号传导通路在正常胃上皮细胞和胃癌细胞中的表达情况。(2)研究Hedgehog信号传导通路特异性抑制剂环巴胺(Cyclopamine)与奥沙利铂单药和联合用药对胃癌细胞增殖、细胞周期以及Hedgehog信号传导通路的影响。方法：(1)采用RT-PCR方法检测了胃永生化上皮细胞GES-1和胃癌细胞BGC-823、SGC-7901和MKN-45中Hedgehog信号传导通路各信号分子的表达水平；(2)采用免疫细胞化学方法检测了MKN-45细胞GLI蛋白的表达；(3)采用CCK-8法检测了不同浓度环巴胺和奥沙利铂单药和联合用药对MKN-45细胞增殖的影响；观察联合环巴胺是否可以提高奥沙利铂抑制细胞增殖的作用(4)采用流式细胞仪检测了环巴胺和奥沙利铂对MKN-45细胞凋亡和周期分布的影响；(5)采用Western-blotting检测了环巴胺和奥沙利铂对Hedgehog信号通路蛋白SHH、GLl1表达的影响。结果：(1)经半定量PCR检测发现在胃永生化细胞GES一1和胃癌细胞BGC-823、SGC-7901和MKN-45中都存在Hedgehog信号传导通路的表达。PTCH和SHH在所有细胞中表达均上调,GLI在GES-1和SGC-7901中未见表达。(2)GLI在MKN-45细胞存在表达,定位于胞核和胞浆。(3)不同浓度的环巴胺和奥沙利铂对胃癌细胞株MKN-45作用24小时、36小时、48小时后,均显示出明显的细胞增殖抑制作用,并呈浓度和时间依赖性；而在GES-1细胞中未观察到环巴胺对细胞的生长抑制作用；环巴胺和奥沙利铂联合用药较单药能更有效抑制细胞增殖(P<0.05)。当15uM环巴胺联合10ug／ml奥沙利铂时,细胞生长抑制率超过15uM环巴胺和15ug／ml奥沙利铂单药的抑制率。(4)环巴胺和奥沙利铂单药均可诱导细胞凋亡,并呈浓度和时间依赖性。两药联用后,MKN-45细胞凋亡比例较单药明显增加(P<0.05)。随环巴胺药物浓度的逐渐递增,MKN-45细胞G0／G1期比例逐渐增加,S期比例逐渐降低；奥沙利铂也可增加G0／G1期比例,降低S期比例；两药联合作用后,MKN-45细胞G0／G1期和G2／M期比例较单药增加更高,S期明显降低(P<0.001)。(5)Western-blotting显示：环巴胺可以下调MKN-45细胞Hedgehog信号通路中的SHH和GLI蛋白的表达,奥沙利铂单药对SHH和GLI的表达无明显影响。结论：(1)正常胃上皮细胞GES-1中存在Hedgehog信号通路,但不表达下游转录因子GLI,而胃癌细胞株MKN-45和BGC-823中存在Hedgehog信号通路的激活,SGC-7901细胞的生长可能不依靠Hedgehog信号通路的激活。(2)GLI表达于MKN-45细胞胞浆和胞核中。(3)环巴胺和奥沙利铂单药和联合用药均可抑制胃癌MKN-45细胞株的增殖,两药联用较单药作用更明显。(4)环巴胺和奥沙利铂均可诱导MKN-45细胞凋亡,使S期DNA合成降低,两药联用较单药作用更明显。提示环巴胺可提高奥沙利铂对胃癌细胞生长的抑制作用。(5)环巴胺可下调Hedgehog信号通路中SHH和GLI蛋白的表达,奥沙利铂无作用。