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背景胰腺癌(Pancreatic Cancer)是一种较常见的消化道恶性肿瘤,其有三大特点:位置隐蔽、缺少早期典型症状;发现时已是晚期、转移扩散快;存活期极短、病死率极高。近年发病率呈明显上升趋势,每10年约增加15%。胰腺癌多发生在40岁以上,在青少年中亦少见发生。男性多见,男女之比为2-4:1。胰腺癌在欧美国家高发,是欧洲、北美和其他经济发达国家肿瘤发病和肿瘤死亡的主要原因之一。日本胰腺癌的发病率亦明显上升,我国国内胰腺癌的发病率亦有明显上升。PEST-containing nuclear protein (PCNP)是一种新的含PEST序列核蛋白,主要存在细胞核内,并且具有泛素化能力的蛋白连接酶。研究发现PCNP不但与细胞周期的调控有关,而且可能参与细胞增殖、凋亡、分化、转移、基因表达、转录调节、信号传递的调控。CTGF(connective tissue growth factor,结缔组织生长因子)是在1991年从人脐静脉内皮细胞的培养基分离出来的一种分泌性蛋白。是即可早期基因CCN家族的成员,又称为CCN2,由349个氨基酸残基组成的,富含半胱氨酸的结合肝素的分泌性多肽,相对分子质量为36-38KD,由高尔基体分泌。最初研究发现CTGF对成纤维细胞具有趋化及促有丝分裂作用,随后发现按不同的细胞类型,CTGF还具有促细胞增殖、迁移及分化等作用。近来,进一步研究发现, CTGF与包括血管、皮肤、心脏、肾脏、胰腺、肺及肝脏等在内的许多组织器官纤维化发生发展密切相关。目前国内大量研究过CTGF在胰腺癌中的表达变化及其相关因素的关系,但从未研究过CTGF和PCNP在胰腺癌中的表达是否有相关性。我们的实验将研究CTGF和PCNP在胰腺癌发病中的作用,并探讨二者在胰腺癌中的相互关系。目的收集胰腺癌的手术切除标本和体外培养胰腺癌细胞株(Panc-1),观察CTGF和PCNP在胰腺癌组织中的表达情况,分析二者在胰腺癌中表达的意义以及相关性。为胰腺癌的发病机制提供线索,并为胰腺癌诊断、治疗以及新药研发提供理论依据。方法1、采用免疫组化技术检测来自临床各期的胰腺癌的手术切除标本及其癌旁胰腺组织中的PCNP和CTGF的表达情况,分析表达水平与胰腺癌病人临床分期、组织学分类、转移之间的关系。2、利用PCR技术检测稳定胰腺癌Panc-1细胞和对照组中PCNP与CTGF基因表达差异。通过Western blot实验研究PCNP与CTGF蛋白表达的相互关系。利用MTT实验、流式细胞术检测对Panc-1细胞生长、增殖、周期及凋亡的影响。结果1. CTGF主要表达于胞浆或胞膜,间质细胞中亦有表达。在胰腺癌组织中,CTGF表达阳性率为81.08%,在癌旁组织中,CTGF表达阳性率11.1%,有统计学意义(P<0.05)。2. PCNP主要表达于胞核,在胰腺癌组织中,PCNP表达阳性率为78.37%,在癌旁组织中,PCNP表达阳性率22.2%,有统计学意义(P<0.05)。3.胰腺癌组织中CTGF的表达与淋巴结转移及分期有相关性,PCNP与淋巴结转移及临分期有一定的相关性,在胰腺癌中PCNP的表达与CTGF的表达有密切的相关性(P<0.05)。4. Western blotting检测到CTGF、PCNP蛋白在胰腺癌Panc-1细胞的表达高于对照组。结论1、胰腺癌组织中和癌旁组织中的CTGF阳性表达存在差异,并且与胰腺癌的分期及淋巴结转移有相关性。2、胰腺癌组织中和癌旁组织中的PCNP阳性表达存在差异,并且与胰腺癌的分期及淋巴结转移有相关性。3、胰腺癌组织中的CTGF与PCNP表达存在相关性。它们的异常表达可能与肿瘤生长和转移有关。检测肿瘤组织中CTGF和PCNP的表达有助于胰腺癌的发病机制提供线索,并为胰腺癌诊断、治疗以及新药研发提供理论依据。4、PCNP的过表达可以促进胰腺癌Panc-1细胞生长以及CTGF表达增高。