大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶种类及相关基因检测

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β-内酰胺类抗菌药物是一类重要的抗菌药物,随着广泛应用,细菌耐药性给全球医学临床治疗及公共卫生安全带来了极大的风险。本试验采用微量肉汤稀释法对贵州范围内规模养猪场分离得到的1087株大肠杆菌进行8种β-内酰胺类抗菌药物的药敏试验。结果表明,除对头孢曲松的耐药率为57.96%相对较低外,对其余的7种抗菌药物的耐药率均超过了60%。其中,对阿莫西林、氨苄西林、头孢氨苄、头孢他啶4种药物的耐药率相对较高,耐药率分别为74.61、72.68%、84.45%、71.57%,对头孢呋辛、头孢噻肟、头孢噻呋的耐药率相近,分别为65.87%、63.11%、68.63%。菌株的多重耐药以5~7重耐药为主。大肠杆菌对头孢菌素类药物和青霉素类药物之间的交叉耐药率高达73~78%。头孢氨苄和其它头孢菌素类药物的交叉耐药率在84~88%之间,头孢曲松和其它的头孢菌素类药物的交叉耐药率在58~62%之间。采用CLSI 2013推荐的双纸片法和三维试验法分别筛选产ESBLs和AmpC酶的菌株,结果得到324株ESBLs菌株和106株AmpC酶菌株,检出率分别为29.81%和9.75%,其中安顺、铜仁、贵阳、黔南和黔西南五个地区ESBLs阳性菌株的检出率分别为38.69%、27.44%、30.65%、30.20%、26.25%,安顺、铜仁、贵阳、黔南和黔西南五个地区AmpC酶阳性菌株的检出率分别为11.68%、3.38%、2.01%、15.92%、15.83%,此外,59株既产ESBLs,又产AmpC酶的菌株,且产酶菌株的耐药水平高于非产酶菌株。利用PCR技术对产酶菌进行ESBLs相关的4种基因和AmpC酶相关的6种基因检测。所得结果为324株ESBLs大肠杆菌中有282株菌为TEM型基因、27株菌为SHV型和163株菌为CTX-M型;得到106株AmpC酶大肠杆菌中有98株菌为CIT型、28株菌为DHA型和12株菌为EBC型。有167株产酶菌含有多中目的基因,以TEM+CTX-M型基因数量最多(73株)。本地区ESBLs和AmpC酶猪源大肠杆菌分别以CTX-M型和CIT型为主。
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