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苹果是世界栽培面积最广树种之一。矮化密植具有早果、丰产、优质、成本低等特点，已成为国内外苹果生产发展的总趋势。但目前在苹果生产中，树体矮化的途径，主要通过选育矮化砧木、短枝型品种以及采用栽培措施来得到致矮目的。利用植物转基因技术，将受不同启动子调控的异戊烯基转移酶基因导入苹果主栽品种，极有希望获得节间缩短、树冠矮小，适于矮化密植的新品种，加快苹果矮化育种的进程。对于苹果来说，建立一套高效基因转化技术体系和平台，将植物基因工程技术更为有效地应用到苹果遗传改良中去，具有重要的理论和现实意义。 本研究以苹果离体叶片为外植体，通过对离体叶片再生条件、抗生素筛选条件和根癌农杆菌介导苹果遗传转化条件的优化，建立了高频再生和转化体系，并将ipt和SSU-ipt基因导入苹果皇家嘎拉中。主要取得以下研究结果： 1．获得高效稳定苹果离体叶片再生体系 细胞分裂素种类对不同基因型苹果离体叶片再生频率影响研究发现，皇家嘎拉用BA效果最好，对富士2001和长富2，细胞分裂素BA、CPPU、TDZ诱导离体叶片分化不定芽的最佳浓度分别为8.0、8.0、1.0～2.0mg/L，其中TDZ效果最佳，CPPU被首次应用与苹果再生试验中，并获得较好再生效率；叶片极性认为，叶片反放再生效率优于正放，同时发现，皇家嘎拉离体叶片中断再生效率最好，而富士2001靠近叶柄端最佳；适宜暗培养时间也因品种不同而有差异，富士暗处理21d、皇家嘎拉14d最为适宜；CH和LH均可促进苹果叶片再生不定芽的形成，但用CH比LH效果要好。AgNO3抑制愈伤组织的形成，有利于试管苗生根，但不利于诱导离体叶片再生不定芽。 2．研究了不同抗生素对不定芽再生的影响，优化确定了选择压 在苹果遗传转化再生试验中，用500～600mg/L Cef和5mg/L Kan，作为脱菌培养和选择培养中的脱菌浓度和选择压；在遗传转化生根试验中，用250～500mg／L Cef和10mg／L Kan进一步筛选转化抗性芽最为适宜。 3．建立了高效转化体系，并将ipt和SSU-ipt基因导入苹果皇家嘎拉中 在本实验条件下，外源基因向苹果皇家嘎拉转移效率明显高于富士2001；琥珀碱型A281介导基因转移能力比章鱼碱型LBA4404明显要高，转移效率二者相差十倍还多。共培养时整叶划痕为最佳切割方式，叶片反放比正放转化效率要高，二者相差接近3倍；延迟3d选择可提高转化效率。同时通过根癌农杆菌介导法，将改变果树农艺性状的SSU-ipt、如亡基因导入苹果皇家嘎拉获得抗性再生植株，通过Kan抗性生物学检测和PCR鉴定抗性芽分化率达到8.9％。