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肺癌是全球癌症死亡的最主要原因。非小细胞肺癌(NSCLC)是80%以上病例的主要亚型。由于缺乏有效的诊断技术,大多数肺癌病例初次诊断即为晚期。在过去几十年中尽管手术,放疗和化疗等治疗手段取得了一定进展,但肺癌的死亡率基本保持不变,这主要是由于其高生长率和易于广泛转移。肺癌的高死亡率是由于肿瘤细胞远离其起源部位发生转移性扩散至其他部位引起的。晚期患者因化疗疗效有限且毒副作用非常明显,导致生存率不甚理想,整体预后不良,迫切需要针对肺癌患者的新治疗策略。本研究寻找到一种新的双向调节肿瘤细胞迁移诱导剂,鞘氨醇磷酸胆碱(Sphingosinephosphorylcholine,SPC),并阐明了不同浓度SPC调节肺癌细胞上皮-间质转化的机制及对裸鼠成瘤的影响。我们发现:SPC通过调控miR-212-3p/SEMA6A通路促进(1μM)或抑制(10μM)肺癌细胞的EMT过程以及肺癌细胞裸鼠肿瘤的发育。体外实验中,通过划痕实验和Western blot,发现1μM SPC促进A549和H157细胞迁移,并使N-cadherin,snail表达升高,E-cadherin表达降低;10μM SPC抑制细胞迁移,使N-cadherin,snail表达降低,E-cadherin表达升高。接着利用转录组测序芯片技术寻找表达差异的关键因子,发现不同浓度SPC显著影响miR-212-3p的表达,通过过表达和沉默miR-212-3p发现,miR-212-3p-mimic抑制细胞迁移,并能减弱1μM SPC的促细胞迁移作用;miR-212-3p-inhibitor促进细胞迁移,并能减弱10μM SPC的抑制细胞迁移作用。Western blot结果显示EMT标志蛋白的变化符合划痕实验的结果。通过靶标蛋白预测和双荧光素酶报告基因实验发现miR-212-3p直接靶向SEMA6A调节肺癌细胞EMT过程。通过siRNA敲低SEMA6A的表达,发现SEMA6A siRNA能显著抑制细胞迁移,并能减弱1μM SPC的促迁移作用。我们建立了裸鼠肺癌细胞肿瘤模型,探究不同浓度SPC对裸鼠成瘤的影响。结果显示:与致瘤组相比,1μM SPC能显著促进肿瘤发育,明显提前肿瘤出现的时间,肿瘤体积和重量明显增大;而10μM SPC能显著抑制肿瘤发育,推迟肿瘤出现的时间,肿瘤体积和重量明显减小。免疫组化结果显示:与致瘤组相比,1μM SPC能显著促进SEMA6A的表达;而10μM SPC能显著抑制SEMA6A的表达。另外,通过对临床肺癌组织和癌旁组织进行SEMA6A免疫组化的检测,发现SEMA6A的表达差异与肺癌患者的分化程度相关。本研究发现SPC能发挥促进(1μM)或抑制(10μM)肺癌细胞EMT的作用,并从肺癌细胞(A549和H157)和荷瘤裸鼠模型两个方面对其进行相关分子机制的研究。SPC是一种存在于血浆中具有生物活性的天然鞘磷脂,细胞毒性低,易穿透细胞膜发挥作用等特点。可做为研究癌细胞迁移和EMT等机制的一种安全的新工具,为治疗肺癌或其他癌症以及在动物的癌症发生提供了新的治疗方向。本研究同时揭示了miR-212/SEMA6A这一通路在调节肺癌细胞EMT中的作用,以及进一步阐明了两种因子的相关作用机制,为治疗肺癌提供新的药物作用靶点。