【摘 要】
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目的:通过对甲状腺滤泡状癌细胞株FTC-133 131I辐射后摄碘能力的改变、碘代谢相关的甲状腺特异蛋白及mRNA的改变的研究,明确131I辐射与分化型甲状腺癌细胞摄碘能力变化、131I辐射与分化型甲状腺癌细胞失分化的关系和相关机制;并通过131I辐射的方法获得失分化的FTC-133细胞株。方法:体外培养分化型甲状腺滤泡状癌细胞株FTC-133,用放射性131I(不同剂量,不同时间)辐射后,检测细
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目的:通过对甲状腺滤泡状癌细胞株FTC-133 131I辐射后摄碘能力的改变、碘代谢相关的甲状腺特异蛋白及mRNA的改变的研究,明确131I辐射与分化型甲状腺癌细胞摄碘能力变化、131I辐射与分化型甲状腺癌细胞失分化的关系和相关机制;并通过131I辐射的方法获得失分化的FTC-133细胞株。
方法:体外培养分化型甲状腺滤泡状癌细胞株FTC-133,用放射性131I(不同剂量,不同时间)辐射后,检测细胞吸碘(125I)率的变化。对辐射前后的细胞,分别用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测钠碘转运体(NIS)、TSH受体(TSHR)、甲状腺球蛋白(TG)和甲状腺过氧化物酶(TPO)mRNA相对含量,用蛋白质印迹法检测NIS、TSHR、TPO蛋白含量,放射免疫测定法(RIA)测定TG蛋白含量,用免疫荧光染色方法检测上述蛋白在细胞内的定位,并做比较。筛选摄碘能力下降最明显的细胞群,通过有限稀释单克隆培养法获得摄碘能力稳定下降的单细胞克隆,建立失分化的FTC-133细胞株,检测NIS、TSHR、TPO和TG mRNA含量、蛋白含量和定位,与原细胞相比较,并观察细胞形态的变化。
结果:131I辐射使FTC-133细胞摄125I能力(cpm/min值)下降,各实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),利用15μCi照射48小时吸碘率下降最明显,下降率为34.6%(t=12.72,P<0.01)。辐射后NIS、TSHR、TPO、TG蛋白以及mRNA含量均下降,在48小时下降最明显,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),蛋白定位无明显变化。获得的失分化FTC-133细胞,摄碘能力明显下降,NIS、TSHR、TPO、TG蛋白含量和mRNA含量明显下降,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:131I辐射可以使FTC-133细胞碘摄取能力的下降,同时使甲状腺特异性基因NIS、TSHR、TPO、TG及蛋白表达下降。131I的辐射导致吸碘率的下降是与碘摄取和代谢有关的一些列分子共同作用的结果,这种变化一种失分化现象。
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