NPPB对顺铂诱导神经胶质瘤细胞损伤的作用

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目的:观察氯离子通道阻断剂NPPB对顺铂(DDP)诱导的神经胶质瘤细胞损伤的影响。方法:应用四氮唑(MTT)比色法检测NPPB对顺铂诱导神经胶质瘤细胞的活性;用RT-PCR法测C6细胞和U251细胞Bcl-2、Bax、ClC-3的mRNA的表达;用WesternBlotting法测定C6细胞和U251细胞Bcl-2、Bax、ClC-3、Cyt-C蛋白的表达。结果:1.MTT比色法结果显示:与对照组相比,NPPB组C6和U251细胞生存率无明显变化;DDP组C6和U251细胞生存率明显下降,为74.95%(P<0.05)。而DDP+NPPB联合组C6和U251细胞生存率与DDP组相比明显增高(P<0.05)。2.RT-PCR结果表明:与对照组相比,NPPB组ClC-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达无明显变化;DDP组ClC-3、Bcl-2 mRNA表达降低,而Bax mRNA表达明显增强,Bax/Bcl-2比值增加。而DDP+NPPB联合组与DDP组相比ClC-3 mRNA表达增高,Bax/Bcl-2比值下降。3.Western Blotting结果显示:与对照组相比,NPPB组Bax、Bcl-2、Cyt-C蛋白表达无明显变化;DDP组Bax/Bcl-2比值及Cyt-C蛋白表达明显增高。而DDP+NPPB联合组Bax/Bcl-2比值下降,Cyt-C蛋白表达明显降低。结论:1.DDP明显降低ClC-3表达,同时增加Bax/Bcl-2比值及Cyt-C蛋白表达;而Bcl-2表达降低,Bax表达增高则提示DDP可能诱导细胞凋亡甚至死亡。2.NPPB能明显逆转DDP诱导ClC-3表达的降低,降低Bax/Bcl-2比值及Cyt-C蛋白表达,由此说明细胞凋亡与DDP抑制C6和U251细胞的增殖作用密切相关。3.NPPB可能通过降低Bax/Bcl-2比值,抑制Cyt-C的释放从而拮抗DDP对肿瘤细胞增殖的抑制作用。
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