目的构建人siALK2（hsiALK2）重组腺病毒；探讨hsiALK2对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭能力的影响。为ALK2功能的深入研究奠定基础。方法用前期设计并合成好的重组腺病毒质粒pAdsiALK2，经PacⅠ酶切后转染至HEK293细胞进行包装，制备重组腺病毒，扩增后进行病毒滴度测定及RT-PCR鉴定，以重组腺病毒siALK2（AdsiALK2）感染MDA-MB-231细胞为实验组，空载病毒（RFP）作为感染对照，并设空白对照组，通过MTT法、平板集落形成试验、细胞划痕试验及Transwell侵袭试验检测细胞的增殖、集落形成、迁移及侵袭能力结果重组穿梭质粒Pses-Hus-siALK2及腺病毒质粒pAdsiALK2经鉴定均构建正确；重组腺病毒AdsiALK2在HEK293中成功包装。腺病毒siALK2和RFP感染MDA-MB-231细胞36h后，荧光表达量一致。MDA-MB-231/SiALK2重组细胞中ALK2表达显著下降。与MDA-MB-231/RFP组相比，MDA-MB-231/siALK2组细胞的增殖活力、集落形成率及划痕愈合率均显著降低（P＜0.05），穿膜细胞数也明显减少（P＜0.05）；而MDA-MB-231/RFP组与空白对照组比较（相比），差异无统计学意义（P＞0.05）。结论成功构建了人siALK2重组腺病毒；通过基因沉默下调ALK2表达后可以在体外抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移与侵袭能力。