口腔癌相关成纤维细胞对血管内皮细胞生物学特性的影响

来源 :四川大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:simon_sx
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[研究背景]癌相关成纤维细胞(carcinoma-associated fibroblasts,CAFs)是肿瘤—宿主界面微环境(tumor-host interface microenvironment)中最重要的宿主细胞,具有独特的生物学特性和功能。血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)是血管生成的靶细胞,肿瘤血管新生受微环境中庞大精密而复杂的信号网络调控,过去的研究多集中于肿瘤细胞对其的调控作用;新近研究发现,CAFs在肿瘤VEC的募集、增殖和血管芽的形成中发挥重要作用。本课题在原有研究基础上,拟进一步探讨口腔CAFs对血管内皮细胞生物学特性的影响,目前国内外尚未见相关报道。[研究目的]通过建立CAFs和血管内皮细胞株ECV304交互作用模型系统:(1)研究口腔CAFs对ECV304细胞形态及活性的影响;(2)研究口腔CAFs对ECV304细胞迁移特性的影响。[研究方法] (1)用组织块培养法获得原代口腔CAFs及正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NFs),建立口腔CAFs和人脐静脉内皮细胞株ECV304相互作用模型,观察CAFs对ECV304细胞形态及生长状况的影响,并采用甲基噻唑基四唑(methyl-thiazolyl tetrazolium,MTT)比色实验检测口腔CAFs对ECV304细胞活性的影响。(2)采用细胞片刮除法检测ECV304在CAFs条件培养基作用下随机运动能力的变化;同时采用微孔滤膜培养小室及双室联合培养系统检测CAFs对ECV304趋化性迁移能力的影响。[研究结果] (1)与CAFs直接共培养时ECV304细胞形态发生变化;与NFs相比,受CAFs作用的ECV304细胞活性在24h、48h时均明显增强(P<0.05);(2)与NFs相比,CAFs作用24h下,ECV304细胞随机迁移数量增多(P<0.05)且最大迁移距离有增大趋势;受CAFs作用12h、24h时,ECV304趋化性迁移能力明显增强(P<0.05),更多ECV304细胞穿透微孔滤膜发生迁移。[结论]口腔CAFs在体外具有增强人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞活性及迁移的能力。本研究首次探讨了口腔CAFs对血管内皮样细胞生物学特性的影响,有助于了解口腔CAFs在血管新生中的作用,为进一步研究CAFs调控肿瘤血管新生的作用及其机制提供实验依据。
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