【摘 要】
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近来,抗体类药物的研制进展迅速,国外已有18个抗体药物批准上市,治疗性抗体的研发已成为生物工程药物研发的热点。由于人源抗体对人体免疫源性低,更适于体内应用,目前抗体药
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近来,抗体类药物的研制进展迅速,国外已有18个抗体药物批准上市,治疗性抗体的研发已成为生物工程药物研发的热点。由于人源抗体对人体免疫源性低,更适于体内应用,目前抗体药物的研制逐渐发展到以人源抗体为主。大容量抗体库是制备人单抗的重要技术平台,一个具有良好多样性,库容在1010-1011的大容量噬菌体抗体库可以提供有效的获得各种人源抗体的可靠手段。 本课题目的是构建大容量噬菌体单链抗体库,从中筛选人源单链抗体,建立人源抗体的制备技术平台。 首先从正常成人外周血和新生儿脐血分离淋巴细胞,逆转录成cDNA,PCR分别扩增出抗体的轻链可变区基因（VL）和重链可变区基因（VH）,通过重叠PCR法将VH和VL拼接形成ScFV基因,然后克隆入噬菌体表达载体PDF中,得到初级单链噬茵体抗体库。然后以高MOI超感染Cre+菌株
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