论文部分内容阅读
该研究将I型MDV Md11株的pp24基因的完整ORF克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,重组质粒pGEX-pp24转化BL21宿主菌后,经IPTG诱导表达.诱导菌体裂解物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,用山羊抗GST抗体进行Western-blotting试验,结果确证了GST-pp24融合蛋白的表达.将表达产物从凝胶中回收,免疫4周龄小白鼠,五次免疫后,采血分离血清.所得血清分别与GA、Md11和CVI988株MDV感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)进行间接免疫荧光试验(IFA),结果表明大肠杆菌表达的pp24基因至少保留了部分天然pp24蛋白的抗原性.另外,该文还用pp38特异的PCR产物标记的核酸标记的核酸探针,对来自包括台湾在内的全国10个省37个鸡群共792只鸡的病理组织样品进行了检测,同时用REV SNV株全基因组cDNA克隆标记的探针检测REV,用CAV Cux-1株全基因组克隆标记的探针检测CAV.结果表明:发病鸡中这三种病毒的检出率均相当高.分别为84％(MDV)、62.8％(CAV)、和58.8％(REV);病鸡中存在非常严重的双得感染(32.6％)和三重感染(45.7％);37个鸡群中的28个存在三重感染(75.6％),5个鸡群存在MDV和CAV的共感染(13.5％),3个鸡群存在MDV和REV的共感染(8.1％),仅有1个鸡群未检测到这三种病毒;在地域分布上,除了广西未检测到CAV外,其余的9个省份均检测到了MDV、CAV和REV,显示这三种病毒在中国已广泛存在.