油茶籽饼粕多糖的提取分离、结构分析及其降血糖活性研究

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油茶籽粕为油茶籽榨取茶油后的饼粕,含有20%-30%的多糖类物质。多糖具有抗氧化、增强免疫、降血糖及抗感染等多种生物活性。开发利用油茶籽粕多糖具有理论价值和实践意义。本文以油茶籽饼粕为原料,试验研究酶法辅助传统热水浸提提取油茶籽饼粕多糖的工艺,并对油茶籽饼粕多糖的结构特征、基本理化性质及其降血糖活性进行了研究。主要研究结果如下:1、响应面法优化了油茶籽饼粕多糖提取过程中的酶解工艺,最佳酶解工艺条件为:酶解温度40℃、酶解时间120min、中性蛋白酶添加量2.0%;正交试验设计优化出油茶籽饼粕多糖提取的最佳工艺条件为:提取温度80℃、料液比1:20(g/mL)、提取时间60min,在此工艺条件下油茶籽饼粕多糖平均得率为18.48%。2、对油茶饼粕粗多糖进行进一步分离纯化。依次经过Sevage法脱蛋白、双氧水脱色、纤维素DEAE-52柱层析分离,用0.4mol/L NaCl溶液洗脱得到了一种多糖组分SCFP,通过高效液相色谱色谱法分析,其为均一片段,分子量约为2.0121×107Da。红外光谱分析表明SCFP具有多糖类物质的特征吸收峰,紫外光谱分析表明SCFP不含蛋白质和核酸。SCFP乙酰化后进行GC分析,结果表明SCFP主要由鼠李糖、木糖和葡萄糖组成,摩尔比为11.19:17.06:5.81。3、研究了油茶籽饼粕多糖对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠的降血糖作用,糖尿病模型小鼠灌胃剂量分别为50、100和200mg/(kg·d)的油茶籽饼粕多糖,阳性对照组则灌胃剂量为10mg/(kg·d)的格列本脲,试验周期为4周。试验结果表明纯化前后的油茶籽饼粕多糖均有效缓解糖尿病小鼠的“三多一少”症状,显著降低了糖尿病小鼠的血糖水平,并呈现剂量依赖性;显著降低了糖尿病小鼠肝脏、肾脏的MDA水平,同时有效提高了糖尿病小鼠肝脏、肾脏的GSH-PX、 CAT及SOD活性。这些结果表明油茶籽饼粕多糖的降血糖作用机制可能是通过提高机体抗氧化酶活性,清除自由基以解除自由基对机体的损害来实现的。
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