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【目的】微小RNA(microRNA,miRNA)是一类非编码单链小分子RNA,长度约为22 nt,在转录水平或者转录后水平调控基因的表达,在多种生理和病理过程中发挥着很重要的作用,如细胞的分化、生长、凋亡以及肿瘤的发生发展等。近期研究表明,miRNA可以通过调节其靶基因的表达参与宫颈癌的发生和发展,从而发挥类似癌基因或抑癌基因的功能。本研究的目的是探寻miR-212/132基因簇是否参与了宫颈癌细胞生长、迁移、侵袭和细胞周期的调控过程,以及预测和确定miR-212/132直接作用的靶基因,从而阐明miR-212/132对宫颈癌发生和发展的分子机制。【方法】首先,我们利用实时定量PCR方法检测了miR-212和miR-132在人类宫颈癌组织和癌旁正常组织中的表达差异。接着,用集落形成实验检测了miR-212和miR-132对宫颈癌细胞系HeLa和C33A增殖能力的影响,并用流式细胞术检测了细胞周期的变化。此外,用transwell迁移和侵袭实验检测了miR-212和miR-132对宫颈癌细胞系HeLa和C33A迁移和侵袭能力的影响,并用western blot和实时定量PCR检测了EMT相关分子标志物的表达差异。随后,我们用生物信息学方法预测并筛选了miR-212和miR-132共同的候选靶基因SAMD2。通过实时定量PCR和western blot方法检测了在宫颈癌细胞系中miR-212和miR-132对SMAD2的mRNA和蛋白水平的影响,并用EGFP荧光报告载体实验验证了miR-212和miR-132对SMAD2的直接靶定作用。最后,我们在宫颈癌细胞系中过表达或敲降SMAD2后,用上述相同的方法检测了SMAD2对细胞功能的影响,并用挽救实验验证了SMAD2对miR-212/132功能上的挽救作用。【结果】实时定量PCR结果显示,与癌旁正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中的miR-212和miR-132表达明显降低,而SMAD2的表达明显升高。在宫颈癌细胞中过表达miR-212和miR-132后,不仅细胞增殖能力减弱、细胞周期G1/S期转换受到阻滞,而且上皮细胞分子标志物E-cadherin表达增加、间质分子标志物Vimentin表达减少、细胞的迁移和侵袭能力减弱。实时定量PCR和western blot实验结果显示在宫颈癌细胞中过表达或封闭miR-212和miR-132后,SMAD2的mRNA表达水平和蛋白表达水平有所降低或升高。荧光报告载体实验结果显示miR-212和miR-132能够直接作用于SMAD2的3’UTR,并对其表达进行转录后调控。在宫颈癌细胞中过表达SMAD2后,细胞增殖能力增强、细胞周期G1/S期转换加强、E-cadherin表达减少、Vimentin表达增加并且细胞的迁移和侵袭能力增加。挽救实验验证了外源性SMAD2能够部分抵消miR-212和miR-132对宫颈癌细胞功能的影响。【结论】miR-212和miR-132在宫颈癌中起到了类似抑癌基因的作用,其发挥调节作用可能是通过调控SMAD2的表达来实现的。