IGF-Ⅰ受体基因反义ODN的合成与纯化鉴定

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本课题涉及用化学方法手动合成序列为:5’-CTC CAT GCG GTA AAT TTCGG-3’(20mer)寡聚脱氧核苷酸,并在合成、纯化、鉴定过程中,对其反应条件和路线进行了探索。此反义ODN碱基排列顺序与人类I型类胰岛素生长因子(IGF-I)受体基因的一段互补,这些反义ODN可特异地与人类I型类胰岛素生长因子(IGF-I)受体基因的信使核糖核酸(mRNA)杂交,从而阻止人类I型类胰岛素生长因子(IGF-I)受体基因的表达,达到抑制肿瘤细胞增长的作用。化学方法手动合成ODN包括如下4个步骤:脱保护、偶联、封闭、氧化,经过20个循环之后,就可以得到20个碱基的目标产物。通过使用1-丁醇、OPC、PAGE、HPLC等方法进行纯化和鉴定后,得到高纯度目标产物。
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