博莱霉素致大鼠肺纤维化TH1/TH2细胞因子变化及卡介菌多糖核酸对其影响的研究

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目的:检测博莱霉素致大鼠肺纤维化不同时间点支气管肺泡灌洗液(BALF)中干扰素γ(IFN-γ)、白介素 4(IL-4)的变化,与正常对照组比较,探讨TH1/ TH2 细胞因子失衡在肺纤维化形成中的作用;检测卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)干预的肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液中 IFN-γ、IL-4、细胞分类的变化,与单纯博莱霉素模型组比较,探讨 BCG-PSN 对TH1/ TH2 失衡的调节作用。 方法:选取 43 只雄性 SD 大鼠,随机分成正常对照组(A 组)6 只和模型组 37 只,采用经气管内一次性注入博莱霉素 A5 (BLM)制作大鼠肺纤维化模型,模型组又分为:BLM 组(B1 组、B2 组、B3 组)22 只,BLM+BCG-PSN 组(C1 组、C2 组)15 只,造模后 7、14、28 天取肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行实验研究。肺组织采用 HE 染色,光镜下半定量评价肺泡炎和肺纤维化的形态学表现;光镜下分析支气管肺泡灌洗液中细胞总数及分类;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测 BALF 上清液中 IFN-γ、IL-4 的含量。 结果:1.支气管肺泡灌洗液中 IFN-γ含量(pg/ml):BLM 组中 B1、B2组 BALF 中 IFN-γ含量 1<WP=4>中 文 摘 要分别为(58.167±9.227) 、(86.022±10.997),较正常对照 A 组(131.033±19.261)明显下降(P﹤0.001); B3组(116.187±11.623)与 A 组比较差异无显著性;BLM+BCG-PSN组中C1组(104.047±17.012)与 B1组(BLM 组)比较,BALF 中 IFN-γ上升(P﹤0.001),但和 A 组对比仍下降(P﹤0.05);C2组 IFN-γ(171.667±29.930)与 B3 组对比明显升高(P﹤0.001),且较对照组也升高(P﹤0.01)。2.支气管肺泡灌洗液中 IL-4 含量(pg/ml):BLM 组中 B1组 BALF中 IL-4(11.15±1.415)较正常对照 A 组(7.155±1.001)升高(P﹤0.001);BLM+BCG-PSN 组中 C1 组(10.38±1.037)较 A 组也升高(P﹤0.001),C1组与 B1组比较差异无显著性;B2组(7.71±1.052)、B3组(7.225±1.051)、C2组(6.80±0.635)与 A 组比较,C2组与 B3组比较差异均无显著性。3.支气管肺泡灌洗液中细胞计数及分类:BALF 中细胞总数(109/L)BLM 组中 B1组、B2组及 BLM+BCG-PSN 组中 C1组分别为(7.8±1.37)、(4.7±0.62)、(7.2±1.43),较正常对照 A 组(1.2±0.32)明显升高(P﹤0.001);细胞分类中,B1组、B2组及 C1组的中性粒细胞、淋巴细胞比例较 A 组升高(P﹤0.001),巨噬细胞比例相应降低(P﹤0.001),B3组、C2组与 A 组、C1组与 B1组、C2组与 B3组相比较,BALF 中细胞总数及分类均无统计学差异(P﹥0.05)。4.肺组织病理半定量分析:BLM+BCG-PSN 组与相应的 BLM 组比较,虽受损程度减轻,但差异无显著性(P﹥0.05)。 2<WP=5>中 文 摘 要 结论:1.在 BLM 致大鼠肺纤维化的过程中,存在“TH2优势”:7、14 天支气管肺泡灌洗液中 IFN-γ分泌减少,7 天时 IL-4 分泌增加;2.卡介菌多糖核酸可促进IFN-γ的分泌,部分纠正博莱霉素致大鼠肺纤维化中TH1/ TH2 细胞因子失衡;3. 卡介菌多糖核酸可对博莱霉素致大鼠肺纤维化的形成起到辅助性防治作用。
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