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目的：喉癌（laryngocarcinoma）是耳鼻咽喉－头颈外科常见的恶性肿瘤之一，约占全身恶性肿瘤的1-5%，近年来发病率升高。喉癌以喉鳞状细胞癌最多见，约占90%。喉癌的发生涉及遗传学和表观遗传学两大机制。伴随着分子生物技术的发展，从分子水平上认识和了解喉癌越来越得到人们的重视。其中对表观遗传学的改变尤其是DNA启动子区甲基化的研究已经成为热点。NDRG1、NDRG2基因是候选抑癌基因，他们在喉癌组织中的作用尚未明确。本课题通过研究NDRG1、NDRG2基因启动子甲基化状态及其蛋白的表达，探讨NDRG1、NDRG2在喉癌组织中的作用及其表达下调或上调的机制，从而为喉癌的病因、诊断及治疗提供新的理论及实验依据。方法：1应用甲基化特异性PCR（methylation specific PCR，MSP）技术检测45例喉癌组织、18例癌旁正常组织中NDRG1、NDRG2基因启动子区CpG岛甲基化情况。2应用免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）S-P法检测45例喉癌组织、18例癌旁正常组织中NDRG1、NDRG2基因蛋白的表达情况。3统计学分析：所有数据均使用SPSS13.0统计软件进行统计学分析， P＜0.05表示差异在统计学上有显著性意义。结果：1NDRG1基因的研究结果1.1NDRG1基因启动子区甲基化发生率及其与临床病理学资料分析NDRG1基因启动子区的甲基化发生率在喉癌组及癌旁组中分别为66.7%（30/45），33.3%（6/18），两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。在喉癌组织中，NDRG1基因启动子区的甲基化发生率与淋巴结转移（P<0.05）、临床分期（P<0.05）有关，与病例分级、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P>0.05）。1.2NDRG1蛋白的表达及其与临床病理学资料分析应用免疫组化S-P法检测45例喉鳞癌组织和18例癌旁正常组织NDRG1蛋白的表达情况，其阳性表达率分别为37.8%（17/45）和88.9（16/18），喉癌组织中NDRG1的蛋白表达明显低于癌旁正常组（P<0.01）。在喉癌组织中，NDRG1蛋白的表达与淋巴结转移（P<0.05）、临床分期（P<0.05）有关，与病例分级、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P>0.05）。1.3NDRG1基因启动子区甲基化状态与NDRG1蛋白表达的相关性在30例NDRG1基因甲基化阳性的病例组中有26例NDRG1蛋白表达缺失。NDRG1基因启动子甲基化与NDRG1蛋白表达密切相关，且呈负相关（r＝-0.713，P<0.01）。2NDRG2基因的研究结果2.1NDRG2基因启动子区甲基化发生率及其与临床病理学资料分析NDRG2基因启动子区的甲基化发生率在喉癌组及癌旁组中分别为53.3%（24/45），22.2%（4/18），两组相比较差异有统计学意义（P<0.05）。在喉癌组织中，NDRG2基因启动子区的甲基化发生率与淋巴结转移（P<0.05）、临床分期（P<0.05）有关，与病例分级、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P>0.05）。2.2NDRG2蛋白的表达及其与临床病理学资料分析NDRG2蛋白在45例喉鳞癌组织和18例癌旁正常组织中的阳性表达率分别为33.3%（15/45）和83.3（15/18），喉癌组织中NDRG2的蛋白表达明显低于癌旁正常组（P<0.01）。在喉癌组织中，NDRG2蛋白的表达与淋巴结转移（P<0.05）及临床分期（P<0.05）有关，与病例分级、临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关（P>0.05）。2.3NDRG2基因启动子甲基化与NDRG2蛋白表达的相关性在24例NDRG2基因启动子区甲基化阳性的病例组中有21例NDRG2蛋白表达缺失。NDRG2基因启动子区甲基化与NDRG2蛋白表达密切相关，且呈负相关（r＝-0.472，P<0.01）。结论：1NDRG1及NDRG2基因在喉癌组中呈现高甲基化及蛋白低表达状态,提示NDRG1及NDRG2基因的高甲基化及蛋白的低表达与喉癌的发生有关。2在喉癌组织中，NDRG1及NDRG2基因启动子区的异常甲基化与淋巴结转移及临床分期有关，提示二者的甲基化可能参与了喉癌的转移和发展。3在喉癌组织中，NDRG1及NDRG2蛋白的低表达与淋巴结转移及临床分期有关，提示NDRG1及NDRG2蛋白表达下调可能参与了喉癌的转移和发展。4在喉癌组织中，NDRG1及NDRG2基因均呈高甲基化及低蛋白表达状态，提示NDRG1及NDRG2基因启动子区CpG岛的异常甲基化可能是抑制NDRG1及NDRG2蛋白表达的机制之一，二者的高甲基化及低蛋白表达可能共同参与喉癌的发生和发展，在喉癌组织中发挥着抑癌基因的作用。