【摘 要】
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目的:通过Morris水迷宫实验,在定位航行与空间探索实验中观察持续低氧条件下SAMP8雄性小鼠在给予双氢睾酮后行为改变。探讨双氢睾酮对小鼠空间学习记忆的影响。观察双氢睾酮对持续低氧条件下SAMP8雄性小鼠海马HIF-1α及SYN、PSD-95、Drebrin蛋白等的表达。探讨给予双氢睾酮后去势小鼠海马的形态学、HIF-1α、以及突触可塑性相关蛋白SYN、PSD-95、Drebrin的表达变化,进
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目的:通过Morris水迷宫实验,在定位航行与空间探索实验中观察持续低氧条件下SAMP8雄性小鼠在给予双氢睾酮后行为改变。探讨双氢睾酮对小鼠空间学习记忆的影响。观察双氢睾酮对持续低氧条件下SAMP8雄性小鼠海马HIF-1α及SYN、PSD-95、Drebrin蛋白等的表达。探讨给予双氢睾酮后去势小鼠海马的形态学、HIF-1α、以及突触可塑性相关蛋白SYN、PSD-95、Drebrin的表达变化,进而了解雄激素对快速衰老小鼠海马突触可塑性的影响。方法:实验分组为对照组（Control）、低氧组（Hypoxia）、双氢睾酮组（dihydrotestosterone,DHT）、低氧双氢睾酮组（Dihydrotestosteron e+Hypoxia,DHT+Hypoxia）应用水迷宫（Morris water maze,MWM）实验,检测各组雄性去势小鼠的空间学习记忆能力。前2天小鼠适应学习,定位航行实验3～7天,每天训练4次。记录小鼠定位航行实验的逃避潜伏期。第8天进行空间探索实验,记录小鼠120秒内穿越平台区的次数和在平台所在象限停留的时间等指标。Golgi-cox染色实验检测海马CA1区突触树突棘密度变化。RT-PCR的方法检测hif-1α、cited2、epo、epor、creb、glut1、erk、syn、psd-95、d rebrin基因的表达变化。Western blot方法检测ERK、p-ERK、Glut1、S YN、PSD-95、Drebrin蛋白的表达。结果:1.数据分析发现:定位巡航实验的5天内,4组去势实验动物的潜伏期均可见到不同程度的缩短。Control组、Hypoxia组潜伏期无显著差异。DHT组较Control组逃避潜伏期明显缩短。且随着天数延长,潜伏期进一步缩短,差异有统计学意义（P<0.05）。DHT+Hypoxia组较Hypoxia组潜伏期第5日缩短,差异有统计学意义（P<0.05）。空间探索和跨越平台实验发现Control组、Hypoxia组小鼠游泳轨迹多为围绕水池边缘做漫无目的环游。DHT+Hypoxia组表现出轨迹明显杂乱。DHT组运动轨迹主要集中在目标象限附近。对各组小鼠目标象限时间进行统计学分析发现DHT组相比Control组,目标象限时间明显延长,差异均有统计学意义（P<0.05）。DHT+Hypoxia组与Control组相比,目标象限时间稍显延长,但差异没有统计学意义。2.Golgi-cox染色实验检测海马CA1区,DHT组和DHT+Hypoxia组突触树突棘密度较Control组显著升高。Hypoxia组较Control组密度降低,无显著差异。3.RT-PCR的方法检测Hif-1α、Cited2、Epo、Epor、Erk、Glut1、Syn、Psd-95、Drebrin基因的表达变化发现。统计学分析发现,与Control组相比Hypoxia组和DHT组的Hif-1α表达增高,Hypoxia组Epo,Epor表达增高,DHT+Hypoxia组表达也增高。DHT组Erk,Glut1,Syn,Psd-95,Drebrin基因表达增高,DHT+Hypoxia组稍高于Control组,但是差异没有统计学意义。4.Western blot方法检测ERK、p ERK、Glut1、PSD95、Drebrin、SYN、Iba1蛋白的表达。统计学分析表明,与Control组相比DHT组和DHT+Hypoxia组ERK、p ERK、Glut1、PSD95蛋白表达增加,DHT+Hypoxia组显著增加,Drebrin、SYN蛋白表达与Control组相比表达增加,但是DHT+Hypoxia组增加没有显著差异。Hypoxia组和DHT+Hypoxia组Iba1蛋白表达增加有统计学差异。结论:1.DHT对SAMP8雄性去势小鼠的空间学习记忆能力有改善作用。DHT对于持续低氧条件下SAMP8雄性去势小鼠的空间学习记忆能力有一定改善趋势,但无统计学意义。2.DHT通过Hif-1α、ERK、Glut1信号通路促进海马神经元突触可塑性蛋白PSD95、Drebrin、SYN的表达。3.DHT对于持续低氧条件下,Iba1蛋白表达增加提示脑组织中小胶质细胞的激活。
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