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发根农杆菌Ri质粒可诱导某些植物产生遗传性状稳定且增殖速度快的毛状根体系,该体系被用于多种药用植物次生代谢物的研究,为利用生物反应器技术,对药用植物有效成分工业化水平的植物细胞悬浮培养开辟了新途径。曼地亚红豆杉(Taxus media)是抗癌药物紫杉醇提取的原材料之一,其毛状根体系的建立有望成为紫杉醇生产的新途径。决明(Cassia obtusifolia L.)是我国传统中药材之一,以其种子入药,有降压、抗癌、提高免疫力、明目等功效,其主要药用成分是大黄酚、橙黄决明素等蒽醌类物质,其毛状根体系的建立为后期其药用成分的规模化生产奠定基础。本文以自然生长的曼地亚红豆杉外植体及决明无菌苗的子叶为材料,对这两种毛状根体系的建立进行研究,主要研究结果如下:1.利用发根农杆菌ATCC 15834菌株侵染自然生长的曼地亚红豆杉茎得到曼地亚红豆杉毛状根。确立了外植体曼地亚红豆杉茎和叶的消毒条件,其中茎的消毒条件为水中扦插6d、升汞消毒30min、乙醇处理约30s,叶的消毒条件为水中扦插6d、升汞消毒20min即可、乙醇处理约30s;经过五个月的转接培养可得到曼地亚红豆杉毛状根,初期的毛状根体系极易褐化,相对于曼地亚红豆杉针叶而言,曼地亚红豆杉茎更适合诱导毛状根,其诱导条件是侵染时间5min、共培养时间2d、诱导率为2.5%,并对其进行rolB、rolC基因鉴定;2.利用三种不同农杆碱型发根农杆菌LBA9402、ATCC 15834、ACCC 10060菌株侵染决明无菌苗的子叶,结果表明三种菌株均能诱导获得毛状根,侵染后第6天即可分化出毛状根,其中LBA9402菌株诱导得到的决明毛状根诱导率最高,诱导条件为侵染时间1Omin,共培养时间1d,其诱导率高达87.5%。经石蜡切片显微观察,决明毛状根与自然生长的决明根相比,其表皮细胞以及皮层细胞,排列紧密,细胞层数较少,微管形成组织细胞排列紧密规整,细胞层数较多。3.在决明总蒽醌含量的测定中发现,决明毛状根、自然生长的决明根以及决明种子中总蒽醌的含量(干重)分别0.078mg/g、0.772mg/g、5.417mg/g。4.比较两种植物的毛状根建立体系可知,决明毛状根较曼地亚红豆杉毛状根的诱导时间短,曼地亚红豆杉毛状根诱导周期需5个月,其生长是在愈伤组织上分化得到的,其根较粗,可观察到明显根毛,易褐化,生长较慢;而决明毛状根诱导周期为7d左右,其在子叶伤口处分化得到,根较细,生长分化能力强,无明显根毛。