【摘 要】
：
背景:勃起功能障碍（ED）是男性常见疾病,不仅影响男性的性行为,对个人情绪、两性关系、生活质量等也有着严重影响。在糖尿病性ED（DMED）的病理生理中,糖基化终末产物（AGEs）在很多关键步骤中起着重要作用。早在1997年就有研究发现DMED患者阴茎中有AGEs的积累,并推测AGEs通过影响诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达来促进ED的发展。我们前期研究证实人尿源
论文部分内容阅读
背景:勃起功能障碍（ED）是男性常见疾病,不仅影响男性的性行为,对个人情绪、两性关系、生活质量等也有着严重影响。在糖尿病性ED（DMED）的病理生理中,糖基化终末产物（AGEs）在很多关键步骤中起着重要作用。早在1997年就有研究发现DMED患者阴茎中有AGEs的积累,并推测AGEs通过影响诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达来促进ED的发展。我们前期研究证实人尿源干细胞（USCs）可以作为细胞载体进行ED基因治疗,改善ED患者海绵体内皮及平滑肌功能,其来源广泛、取材方便、对机体无创。本项目首次尝试探究人尿源干细胞对糖基化终末产物损伤的海绵体血管内皮细胞（CCECs）的影响。对体外培养的CCECs进行AGEs处理,随后进行USCs共培养后检测细胞迁移、凋亡及氧化应激等各项指标,以期阐明USCs治疗DMED的可能分子机制,为临床开发简单、容易提取的ED干细胞联合基因治疗策略提供前期研究基础。寻找男性勃起功能障碍的治疗新的方法。目的:本项目基于前期系列研究结果,应用各种分子生物学的方法首先体外培养分离人尿源干细胞（USCs）及CCECs,然后分组进行USCs与AGEs影响的CCECs共培养,并检测氧化应激、凋亡、迁移、增殖等各项指标,以期发现和找到USCs保护AGEs损伤的CCECs的分子机制,建立DM ED细胞-基因治疗的重要平台。方法:体外培养大鼠阴茎海绵体血管内皮细胞,流式细胞仪鉴定其表面标志物,收集3名健康成年男性无菌尿液9份,分离、原代培养USCs,流式细胞仪鉴定USCs细胞表面标志物。将实验分为六组,分别为正常对照组:CCECs单独培养、干细胞上清组:CCECs+USCs上清条件培养基、干细胞组:CCECs+USCs共培养、AGEs组:CCECs+AGEs、AGEs+干细胞上清组:CCECs+AGEs+USCs上清条件培养基、AGEs+干细胞组:CCECs+AGEs+USCs共培养。在相应组别加入糖基化终末产物（200μg/ml）处理24小时后,CCK8法鉴定各组细胞增殖能力;Transwell检测各组细胞迁移能力;Annexin V法检测各组细胞凋亡情况;Elisa检测细胞SOD及GSH-PX酶活性;荧光定量PCR及Western Blot检测Bcl2、Bax、SOD、GSH-PX、ROS、eNOS目的基因的mRNA表达及蛋白含量表达水平。结果:成功分离培养人USCs,鉴定CD44,CD73,CD90,CD146分子表达强阳性,而CD31,CD45分子表达阴性。成功分离培养大鼠阴茎海绵体血管内皮细胞,流式细胞仪鉴定表型CD31阳性、CD90阴性。CCK8、Transwell、Annexin V实验显示各组中AGEs处理组增殖、迁移能力显著低于未加入AGEs组,凋亡情况高于未加入AGEs组。而USCs干预组增殖、迁移能力显著高于无USCs干预组,凋亡情况低于无USCs干预组。Elisa检测显示USCs干预组SOD、GSH-PX酶活性高于无USCs干预组。qPCR及Western Blot检测显示USCs干预组Bcl2、SOD、GSH-PX、eNOS目的基因mRNA表达及蛋白含量表达水平高于无USCs干预组;Bax、ROS表达水平低于无USCs组。结论:尿源干细胞取材简便广泛且无创,具有多向分化的潜能,是干细胞移植治疗DMED的一种理想细胞。糖基化终末产物对海绵体血管内皮细胞的增殖、迁移能力有损伤并使其凋亡增加,USCs能改善相关指标,对受AGEs损伤的CCECs具有保护作用。
其他文献
＜正＞ 1979年夏,湖南省地质局区域地质测量队在湘西北地区测制志留系剖面时,采集了一批双壳类化石交我所鉴定。经笔者初步鉴定有9属16种,其中1新属6新种;喙壳类1属1新种。我国志留纪双壳类的研究十分薄弱。以往只零星报道过江苏南京、云南、湖北和贵州等地志留纪的双壳类。本文记述的材料不仅为南方志留系的划分、对比提供新的依据,并且丰富了我国志留纪双壳纲动物群的记录。
研究背景肝癌是癌症相关死亡的第四大常见原因,发病率每年都在增加。在肝癌的早期阶段,手术切除和器官移植是治疗肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma,HCC）最有效的方式,但由于复发率与转移率较高,患者的总生存期并不理想;传统药物和索拉非尼对患者的生存收益有限,因此迫切需要寻找新的生物治疗策略。糖基化在多种细胞生理过程中都起重要作用,如信号识别、突触信号传导等;细胞糖基化蛋白是研发
与燃煤电厂常规物料处理相比，污泥储运系统的设计不仅要考虑不同泥种的影响，还要考虑储运环节的除臭和安全问题，显得更为复杂。基于近些年的工程设计经验，对污泥的特性进行分类总结，对不同含水率污泥的接收、储存和输送系统的设计要点、设备选型、工艺流程、典型布置及注意事项等进行分析总结。
为理解不同污染源产生的大气颗粒物、黑碳（BC）和挥发性有机物（VOCs）的排放特征，于民用燃煤烟气、餐饮油烟和施工扬尘条件下，对大气颗粒物质量浓度、BC和VOCs浓度以及颗粒物数浓度与质量浓度的粒径分布进行现场测量。结果表明，不同污染源排放的颗粒物、BC、VOCs浓度、颗粒物粒径分布及相关性差异明显。其中，燃煤烟气和施工扬尘排放的颗粒物质量浓度主要分布在粗粒子中，较小和较大粒径颗粒物的数浓度增加显
目的 探讨重组牛碱性成纤维细胞生长因子（rb-bFGF）联合微针疗法治疗痤疮凹陷性瘢痕患者的临床效果。方法 选取100例痤疮凹陷性瘢痕患者作为研究对象，将其随机分为对照组和观察组，各50例。给予对照组rb-bFGF治疗，在对照组治疗基础上给予观察组微针疗法治疗，两组均连续治疗6个月。比较两组患者治疗6个月后的临床疗效、瘢痕改善情况、治疗前后的瘢痕凹陷度及光滑度评分、血清炎症因子水平，以及治疗期间不
污泥燃煤电厂协同焚烧仍是今后相当长一段时间的主流工艺技术。以扬州市污泥干化协同焚烧为例，基于污泥全干化与燃煤电厂协同焚烧发电的关键技术问题诸如污泥含固率控制、掺烧条件、电厂污染物控制、干化厂污染物控制等深入剖析基础上，简要介绍工程关键工艺参数设计和技术要点分析。污泥干化厂结合燃煤电厂协同焚烧须密切关注污水、臭气、烟道受热面侵蚀和烟气处理等难题，污泥干化厂生产污水和臭气污染物控制仍是工程应用须重点关
目的:胃肠道肿瘤是目前威胁人类健康最常见的肿瘤。本研究的目的是建立和验证结肠腺癌（COAD）RNA结合蛋白（RBPs）的预后模型、探讨long non-coding RNAs（lncRNAs）、micro RNAs（miRNAs）和 mRNAs 在胃腺癌（STAD）中的相互作用并构建竞争性的内源性RNA（ceRNA）网络以及探究ceRNA网络中铁死亡相关基因SLC1A5与免疫浸润的相关性。方法:我
目的 优化维生素C葡萄糖苷可溶性微针的处方及制备工艺，并对其进行评价。方法 根据吸湿性、机械强度、基底柔性筛选微针基质材料，采用两步法制备维生素C葡萄糖苷可溶性微针。以荧光素钠为模型药物筛选背衬溶剂，通过质构仪测定微针的硬度，结合模拟皮肤穿刺实验和台盼蓝染色法考察微针的皮肤穿刺能力。采用改良的Franz扩散池评价载药微针的体外经皮渗透性。结果 PVP K90微针机械强度最高，且基底具有一定柔性，因
背景:乳腺癌已成为全球第一大癌症。约30～50%的不可触及的乳腺癌因微钙化被发现。新辅助治疗（neoadjuvant therapy,NAT）能缩小肿瘤,提高不可手术肿瘤的可切除性并增加保乳机会。NAT后残留肿瘤的大小对于手术决策具有重要意义。然而NAT后即使手术证实肿瘤达到病理完全缓解（pathologic complete response,pCR）,乳腺X线摄影（mammography,MG
研究背景:前列腺癌（Prostate cancer,PCa）是男性泌尿生殖系统最常见的肿瘤,近年来中国前列腺癌的发病率和死亡率呈现明显上升的趋势。细胞骨架是细胞形态改变和细胞运动的结构基础,肿瘤细胞骨架重构是肿瘤细胞上皮间质转变（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）和转移的生物结构基础。本课题组前期研究证实肌球蛋白磷酸酶靶亚基1（Myosin phospha