马铃薯汁加地塞米松预防氟尿嘧啶致静脉炎的实验研究及临床观察

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目的:研究马铃薯汁和地塞米松制成的混合液外涂预防氟尿嘧啶化疗静脉炎的效果及机制。方法:1.动物实验:选择同一品种普通级家兔46只(普通级动物实验室提供),雌性24只,雄性22只,体重2.0-3.3kg,月龄3-6个月,按照随机分配法分为四组,其中:A组(涂地塞米松与马铃薯汁混合液)18只、B组(不涂药组)18只、C组(涂地塞米松液)5只、D组(涂马铃薯汁)5只。四组均在家兔末端耳缘静脉部位,按药量12mg/kg/天,液量10ml/kg/天,给予静脉推注氟尿嘧啶(5-Fu)连续化疗3日,A组、C组及D组按上述设计要求在化疗期间于5-Fu给药后的0、30、60、90、120、180、240、360、480分钟从以穿刺点为中心,直径0.5 cm的圆形以外的皮肤开始涂抹药物,纵向沿静脉回流方向涂3-4cm,横向由耳缘外侧至耳缘静脉内侧涂1.5-2cm。各组涂抹各自的预防药物。化疗结束后,改为每日8:00开始涂上述预防药,隔120分钟涂一次,每日5次,于72小时后停止。先用肉眼观察穿刺处血管及周围组织情况炎症的发生率,并记录,然后处死家兔,自最后一次穿刺针眼上方1.5cm处沿血管回流方向,剪取血管及其周围组织(取长3cm,宽度以穿刺血管为中心,每侧均为0.5cm),迅速置于10%甲醛溶液中固定,进行制片及HE染色,在显微镜下观察血管壁炎细胞浸润,血管壁损坏,血管壁纤维组织增生,血管内血栓形成,血管周围出血,及血管周围组织水肿的发生率。采用Fisher确切概率法进行各组间两两比较,以P<0.05为差异有显著性。2.免疫组化:将A组与B组切下的组织切片,用3-氨基丙基三乙基硅烷(APES, SIGMA)硅化的玻璃片裱片,置于56℃烤箱中烘烤48h后进行IHC染色。光镜观察,血管内皮细胞胞浆内出现棕黄色颗粒沉着,为ICAM-1和VEGF阳性细胞。计算每组中阳性细胞占血管内皮总细胞的百分数,进行比较,以P<0.05为差异有显著性。3.临床观察:临床观察中采用5-Fu静脉化疗的消化道癌患者100例,其中观察组(E组50例),给予马铃薯汁和地塞米松制成的混合液外涂,对照组(F组50例)不涂药,比较化疗后静脉炎的发生情况。采用Fisher确切概率法进行组间两两比较,以P<0.05为差异有显著性。结果:1.动物实验:肉眼观察结果:静脉炎发生率,A组为11.11%(2/18),B组为100.00%(18/18),C组为80.00%(4/5),D组为80.00%(4/5)。采用Fisher确切概率法对每组进行两两比较分析,得出:A组与B组比较,差异有显著性,P<0.0001;A组与C组比较,差异有显著性,P=0.008;A组与D组比较,差异有显著性,P=0.008;B组与C组比较,差异无显著性,P=0.217;B组与D组比较,差异无显著性,P=0.217;C组与D组比较,差异无显著性,P=1。显微镜观察结果:血管壁炎细胞浸润的发生率,A组为50.00%(9/18),B组为100.00%(18/18),C组为60.00%(3/5),D组为100.00%(5/5)。采用Fisher确切概率法对每组进行两两比较分析,得出:A组与B组比较,差异有显著性,P=0.001;A组与C组比较,差异无显著性,P=1;A组与D组比较,差异无显著性,P=0.116;B组与C组比较,差异有显著性,P=0.04;B组与D组不能比较;C组与D组比较,差异无显著性,P=0.444。血管壁损坏的发生率,A组为11.11%(2/18),B组为66.67%(12/18),C组为100.00%(5/5),D组为60.00%(3/5)。采用Fisher确切概率法对每组进行两两比较分析,得出:A组与B组比较,差异有显著性,P=0.002;A组与C组比较,差异有显著性,P=0.001;A组与D组比较,差异有显著性,P=0.048;B组与C组比较,差异无显著性,P=0.272;B组与D组比较,差异无显著性,P=1;C组与D组比较,差异无显著性,P=0.444。血管壁纤维组织增生的发生率,A组为61.11%(11/18),B组为100.00%(18/18),C组为100.00%(5/5),D组为40.00%(2/5)。采用Fisher确切概率法对每组进行两两比较分析,得出:A组与B组比较,差异有显著性,P=0.008;A组与C组比较,差异无显著性,P=0.272;A组与D组比较,差异无显著性,P=0.618;B组与C组不能比较;B组与D组比较,差异有显著性,P=0.006;C组与D组比较,差异无显著性,P=0.167。血管内血栓形成的发生率,A组为5.56%(1/18),B组为61.11%(11/18),C组为100.00%(5/5),D组为40.00%(2/5)。采用Fisher确切概率法对每组进行两两比较分析,得出:A组与B组比较,差异有显著性,P=0.001;A组与C组比较,差异有显著性,P<0.0001;A组与D组比较,差异无显著性,P=0.107;B组与C组比较,差异无显著性,P=0.272;B组与D组比较,差异无显著性,P=0.618;C组与D组比较,差异无显著性,P=0.167。血管周围出血的发生率,A组为11.11%(2/18),B组为72.22%(13/18),C组为40.00%(2/5),D组为80.00%(4/5)。采用Fisher确切概率法对每组进行两两比较分析,得出:A组与B组比较,差异有显著性,P<0.0001;A组与C组比较,差异无显著性,P=0.194;A组与D组比较,差异有显著性,P=0.008;B组与C组比较,差异无显著性,P=0.297;B组与D组比较,差异无显著性,P=1;C组与D组比较,差异无显著性,P=0.524。血管周围组织水肿的发生率,A组为5.56%(1/18),B组为66.67%(12/18),C组为40.00%(2/5),D组为80.00%(4/5)。采用Fisher确切概率法对每组进行两两比较分析,得出:A组与B组比较,差异有显著性,P<0.0001;A组与C组比较,差异无显著性,P=0.107;A组与D组比较,差异有显著性,P=0.003;B组与C组比较,差异无显著性,P=0.343;B组与D组比较,差异无显著性,P=1;C组与D组比较,差异无显著性,P=0.524。免疫组织化学染色结果:A组和B组ICAM-1阳性细胞百分数比较:A组的ICAM-1阳性细胞百分数低于B组,差异有显著性,P<0.0001;A组和B组VEGF阳性细胞百分数比较:A组的VEGF阳性细胞百分数低于B组,差异有显著性,P<0.0001。2.临床病例观察:E组未发生静脉炎的病例数为44例,发生静脉炎的病例数为6例,静脉炎的发生率为12.00%(6/50);F组中未发生的为4例,发生的为46例,静脉炎的发生率为92.00%(46/50)。采用Fisher确切概率法进行统计分析,E组静脉炎发生率低于F组,差异有显著性(P<0.0001)。结论:动物实验和临床应用结果认为:按照规定方法行马铃薯汁和地塞米松制成的混合液外涂,从外观上在降低5-Fu导致的静脉炎发生率,优于单纯涂抹马铃薯汁、地塞米松及不涂药。动物实验中,从镜下观察,其抑制率优于单纯涂抹马铃薯汁、地塞米松及不涂药。免疫组化结果进一步反映出马铃薯汁和地塞米松制成的混合液防治兔浅静脉炎的作用与其抑制血管损伤时细胞内黏附分子1和血管内皮生长因子的升高有关。
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