对原因不明复发性流产患者的蜕膜和外周血中NK细胞水平的研究及其临床意义的探讨

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目的:探讨蜕膜自然杀伤细胞(decidual natural killer cells,dNK cells)在原因不明复发性流产(unexplained recurrent spontaneous abortions,URSA)患者在母胎界面的定位、表型、含量的变化,以及流产后六个月内外周血自然杀伤细胞(peripheral blood naturalkiller cells,PBNK cells)含量的变化,揭示母胎界面dNK细胞表达水平与URSA发病机制的关系及监测PBNK细胞含量的临床意义。方法:1.收集URSA患者(实验组)和正常早孕妇女(对照组)蜕膜组织及流产前外周血各20例,制备成冰冻切片,采用间接免疫荧光双标法检测两组流产前dNK细胞的定位、表型及含量,流式细胞术检测PBNK细胞的表型及含量。2.收集URSA患者(实验组)流产后1月、2月、3月、4月、5月、6月和正常非孕妇女(对照组)外周血各20例,流式细胞术检测PBNK细胞的表型及含量。结果:1.dNK细胞分布在蜕膜组织间质中,积聚于血管周围。URSA组和正常早孕组CD56~+CD16~+dNK细胞的含量分别为(8.82±4.2)/20HPF和(4.59±5.7)/20HPF, URSA组多于对照组,有显著性差异(P<0.05),两组dNK细胞CD56~+CD16~+/CD56~+CD16~-比值分别为(0.25±0.13)和(0.11±0.08),URSA组高于对照组,有显著性差异(P<0.05)。2.PBNK细胞以CD56~+CD16~+亚群为主。URSA组(流产前)和正常早孕组CD56~+CD16~+PBNK细胞占其单个核细胞的百分含量分别为(15.2±5.29)%和(11.9±3.4)%,URSA组多于对照组,有显著性差异(P<0.05)。3.URSA组(流产后六个月)和正常非孕组CD56~+CD16~+PBNK细胞占其单个核细胞的百分含量分别为(13.9±4.0)%、(14.5±5.2)%、(14.4±5.8)%、(13.0±4.5)%、(15.3±5.8)%、(14.2±6.1)%和(10.8±5.4)%,URSA组CD56~+CD16~+PBNK细胞百分含量在流产后六个月内无明显变化,与正常非孕组比较,URSA组流产后1、2、3、5、6月CD56~+CD16~+PBNK细胞百分含量明显升高,有显著性差异(P<0.05)。结论:1.URSA患者CD56~+CD16~+dNK细胞含量高于正常妊娠者,CD56~+CD16~+dNK细胞主要积聚在血管周围,可能是CD56~+CD16~+dNK细胞的含量增加导致母胎界面胚胎植入过程的血管重构异常,参与URSA的发生。2.URSA患者CD56~+CD16~+PBNK细胞含量高于正常妊娠者。3.长期随访发现流产后CD56~+CD16~+PBNK细胞>12%,可能是CD56~+CD16~+PBNK细胞迁移到母胎界面参与URSA的发生,CD56~+CD16~+PBNK细胞>12%可能作为URSA的诊治和疗效观察的新指标。
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