红曲色素高产菌株的高通量选育

被引量 : 0次 | 上传用户:signet886
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
高通量筛选平台包括两个相辅相成技术体系:高通量的培养技术和高通量的检测技术。本文以红曲色素高产菌株的筛选为目标,建立了一整套基于24孔板的微型化培养与检测体系。采用菌丝悬浮液作为24孔板种子培养方式,解决了红曲霉在微孔板培养过程中容易结球的问题;同时考察了24孔板的装液量、蒸发量等特性以及微培养与500ml摇瓶培养的发酵参数等方面的差异,结果表明微型化培养体系与摇瓶培养具有良好的相关性,整个培养过程简单,体系稳定,完全可以用于红曲霉的液体发酵培养。本文还完成了红曲色素的高通量检测技术,将整块24孔板的发酵液用8孔道移液器批量加入70%乙醇溶液进行浸提处理,然后于板式离心机离心取上清适当稀释,用酶标仪在530 nim波长下测定吸光度,可同时处理96个样品,检测效率大大提高。对建立的高通量培养和筛选平台进行了初步运行与验证:采用紫外-氯化锂复合诱变紫红曲霉,获得324份复合突变株,经发酵培养后有51株菌在孔板中生长,其中9株复合突变菌株的发酵色价高于出发菌株,且菌株D39的红曲色素达到42.7U/ml,比出发菌株提高了46.2%。将D39分离纯化并用摇瓶验证,得到纯菌株D39-4的摇瓶发酵色价为206.5 U/ml,比出发菌株提高了51.1%,且遗传稳定性良好,具有很好的工业应用前景。对高产菌株D39-4的发酵培养基采用24孔板培养方法进行响应面优化,得到发酵培养基的最佳配方为:葡萄糖51.42g/L,蛋白胨4.91 g/L,NaNO3 1.00g/L, KH2PO41.00g/L,MgSO4-7H2O 1.00g/L,摇瓶培养色素产量为265.8 U/ml,比原配方提高了近30%。
其他文献
股票信息指标筛选管理系统是针对股票信息的价格信息,通过指标进行判断与筛选的信息系统。本论文的工作如下:(1)详细分析了这个系统的背景、特点以及各个系统的组成部分,说明
本论文通过对周作人早期阅读活动的调查,试图寻找传统文化影响周作人思想、文章与人生道路抉择的内在理路并加以描述。论文大致以周作人“儒释道思想”、“个人主义”和“民
随着全省公安信息化建设的不断深化,浙江省公安厅逐渐开始关注以信息化应用优化公安机关工作流程。公安信息化应用的成果开始惠及到省公安厅机关自身办文流程的优化和办公效
2005年中央一号文件提出了在三年内全部取消农业税的目标,农民的负担大大减轻,但是随着农业税在我国全面取消,农村基层组织运转、公益事业发展经费来源成为困扰农村基层干部
本研究目的主要意义为通过传教士资料考察从19世纪中期(1843年上海开埠后)到20世纪上半时期(1847-1941)中的上海方言中发生的语音演变。本文借用了几个历史语言学概念,将阐述
目前世界能源形势日益严峻,如何寻求一条新的能源发展之路,是一个非常有意义的研究课题。地源热泵空调技术作为一种节能、环保的可再生能源应用技术,在国外已经开始走向成熟,
在我国,逮捕是最严厉的刑事强制措施。它犹如一把双刃剑,运用得当,可以有效打击犯罪、维护社会稳定,运用不当,则会侵犯他人权利、破坏法制尊严。正因如此,对逮捕的研究显得尤
课余体育训练是学校体育的重要组成部分,在整个运动训练体系中处于基础地位,是学校体育教学和课外活动的延伸和提高。课余体育训练的基本任务是发展学校体育,增强学生体质,提
水稻是我国最重要的粮食作物之一,水稻产业的发展状况直接影响大米的市场供给,关系着全国粮食市场的稳定程度以及国家的粮食安全水平。而要长期维持稳定良好的水稻生产发展趋
问题:2011年我国进入了新医改攻坚之年。多年以来的“看病难,看病贵”的现象得到缓解,但是根本问题仍然没有得到解决。随着我国老龄化现象的日趋严重和国民对健康要求的逐步提