SD大鼠外源性因素所致反流性食道炎的实验研究

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目的:通过建立SD大鼠反流性食管炎(Reflux Esophagitis, RE)动物模型,观察食管大体形态和组织学改变,研究环氧合酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)在反流性食管炎SD大鼠食管组织中的表达。为外源性因素所致反流性食管炎动物模型的制备提供实验基础及理论依据。方法:40只SD雄性大鼠(体重220-240克),随机分为实验组和对照组:(1)实验组(n=30)每天下午14:00给予酒脂混合溶液(3:2)灌胃,从10mL/kg量开始,每3天按2.5mL/kg增加,至15mL/kg后保持此量灌胃,持续12周。高脂乳剂配方:猪油500g,胆固醇100g,胆酸33g,丙二醇150mL,蒸馏水200mL,配制成均匀乳剂。酒脂混合溶液配制:取56度白酒与上述高脂乳剂按体积比3:2混合,形成乳白色奶状溶液。对照组(n=10)以等容量生理盐水灌胃。实验组、对照组均自由进食标准颗粒饲料及饮水。分笼饲养于室温(23±2)℃,湿度(55±5)%的清洁级动物实验室。(2)实验组分别于第4,8,12周处死10只SD大鼠,处死前24h禁食,6h禁水。从SD大鼠食道贲门上缘处取出食管约3cm,纵行剖开,取食道中下段部分,观察食管大体形态和组织学改变,研究环氧合酶-2(COX-2)在反流性食管炎SD大鼠食管组织中的表达。对照组SD大鼠于第12周处死,处理同上。(3)利用统计软件SPSS16.0对数据进行统计分析。结果:(1)存活情况:实验组4周、8周、12周存活率分别为100%、90%、100%。对照组存活率为100%。(2)食管黏膜肉眼表现分级:实验组(4周)Ⅰ级60%,Ⅱ级40%;实验组(8周)Ⅰ级50%,Ⅱ级30%,Ⅲ级20%;实验组(12周)Ⅱ级50%,Ⅲ级50%。对照组食管黏膜肉眼表现均为0级。食管黏膜肉眼表现实验组(4周,8周,12周)与对照组之间比较有显著性差异。反流性食管炎动物模型的食管黏膜肉眼表现在4周与12周比较有显著性差异(X2=11.075,P<0.05)(3)HE染色病理分级:实验组(4周)轻度60%,中度40%;实验组(8周)轻度50%,中度20%,重度30%;实验组(12周)中度50%,重度50%。对照组食道黏膜组织正常,黏膜层偶见少量淋巴细胞浸润。HE染色病理分级实验组(4周,8周,12周)与对照组之间比较有显著性差异。反流性食管炎动物模型的食管黏膜肉眼表现在4周与12周比较有显著性差异(X2=11.075,P<0.05)。(4)环氧合酶-2(COX-2)的表达:在实验组不同时期(4周、8周、12周)的表达两两比较有显著性差异。在第12周表达最强,第4周最弱。结论:(1)在SD大鼠反流性食管炎动物模型的制备中,实验组(4周、8周、12周)与对照组比较均具有显著差异,表明SD大鼠动物模型的制备具有科学实用性及可行性。(2)通过对实验组存活率和存活期的观察,表明本研究所制备的动物模型可持续喂养,较长时期存活,为反流性食管炎的研究提供了可靠的实验动物模型。(3)实验组不同时期(4周、8周、12周)食管黏膜肉眼分级、病理观察分级及环氧合酶-2(COX-2)的表达呈一个连续损伤的过程,并且随着时间的进展,损伤在逐步加重。
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