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目的通过研究促红细胞生成素(Erythropoietin ,EPO)对SD大鼠脑缺血再灌注损伤脑红蛋白( Neuroglobin NGB )和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1 MCP-1)表达的影响,探讨EPO在脑缺血再灌注损伤中的保护作用机制。方法将96只健康成年雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组(正常组)、假手术组、缺血再灌注组(模型组)、EPO干预组(EPO组),每组24只。各组分设三个亚组:缺血前2 h组(-2h亚组)、缺血后6h组(+6h亚组)、缺血后24h组(+24h亚组),每个亚组8只。采用Zea Longa改良[1]线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型,EPO干预组于缺血前2 h、缺血后6 h、缺血后24h予以EPO3000 IU/ kg[2]腹腔注射,模型组、假手术组和正常组于相应的时间,予以等量生理盐水腹腔注射,模型组、EPO干预组于缺血后2小时拔出栓线实施再灌注,四组72h后进行神经功能缺损评分并处死取脑,石蜡包埋切片, HE染色、Nissl染色以及脑红蛋白和单核细胞趋化蛋白-1免疫组织化学染色,光镜观察组织学变化以及计数缺血侧大脑皮层脑红蛋白和单核细胞趋化蛋白-1阳性反应细胞。实验数据采用SPSS 13.0统计软件进行多个样本均数比较的配伍设计双因素方差分析,以P<0.05或P<0.01为显著性检验水准。结果:1神经功能缺损评分缺血再灌注72h后,EPO组神经功能缺损评分,明显低于模型组相应亚组。两组中各相应亚组比较均有显著性差异(P<0.01),正常组和假手术组中各亚组评分均为0分。2 HE染色正常组和假手术组皮层神经细胞形态正常,数量多,排列整齐。模型组皮层神经细胞稀疏,细胞间隙增大,并可见大量细胞变性坏死,表现为胞体皱缩,核固缩深染,核仁消失;而EPO组神经细胞存活数量增多,损伤程度减轻。3 Nissl染色正常组及假手术组皮层神经细胞膜呈蓝紫色,胞核呈饱满的淡蓝色,可见很多紫蓝色的尼氏小体,细胞排列整齐;模型组尼氏小体溶解消失或很少;EPO组与模型组相比尼氏小体增多。4脑组织中NGB的表达各亚组之间的NGB阳性细胞表达比较:正常组与假手术组相应亚组比较(P>0.05),无统计学意义,模型组、EPO组分别与正常组相应亚组比较( P<0.01),模型组、EPO组分别与假手术组相应亚组比较(P<0.01),与模型组相应亚组比较,干预组棕黄色颗粒显著增加(P<0.01),皆有显著性差异。EPO组各亚组之间的NGB阳性细胞的表达比较:-2h亚组与+6h亚组比较及-2h亚组与+24h亚组比较(P<0.01),皆有显著性差异,但+6h亚组与+24h亚组比较P>0.05),无统计学意义。5脑组织中MCP-1的表达各亚组均可见MCP-1表达的阳性细胞,其中正常组和假手术组可见少量的棕黄色颗粒,散在分布于皮层和海马,两者相应亚组比较差异无显著性( P > 0. 05);EPO组明显高于正常组和假手术组相应亚组( P < 0. 01 ) ;与模型组相应亚组比较,EPO组棕黄色颗粒显著减少( P < 0. 01 )。EPO组各亚组之间的MCP-1阳性细胞的表达两两比较提示:-2h亚组与+6h亚组、-2h亚组与+24h亚组比较P<0.01,皆有显著性差异,+6h亚组与+24h亚组比较(P>0.05)无统计学意义。结论:1、在大鼠脑缺血再灌注损伤模型中,EPO可通过抑制神经细胞变性坏死、减轻脑缺血再灌注损伤,从而发挥脑保护作用。2、EPO的神经保护作用机制可能与促进NGB表达和抑制MCP-1表达有关,推测其参与了脑缺血再灌注损伤的抗凋亡与抗炎作用。