hnRNPA2B1基因抑制对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞周期、增殖和凋亡的影响

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dmj_66666
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的hnRNPA2B1属于广泛表达的核内不均一核糖蛋白类的(hnRNPs)A/B亚科。 hnRNPA2B1过表达已在许多癌症中有所报道,这其中包括乳腺癌,胰腺癌,肝癌和胃肠道癌症等等。据报道它在与癌症相关的基本生物学过程中起到关键性的作用。沉默hnRNPA2B1基因从而抑制癌细胞生长已在多种类型的癌症中得到验证,但在乳腺癌方面尚未有单独报道。为了证实这一问题,我们运用基因沉默技术,靶向沉默乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231中hnRNPA2B1基因,观察细胞增殖、凋亡和细胞周期的变化。方法构建hnRNPA2B1/shRNA质粒三对和阴性对照一对,分别转染乳腺癌细胞从而抑制乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231中hnRNPA2B1基因的表达。之后,运用实时定量PCR技术对基因抑制率进行观察和分析,并筛查出抑制率相对较高的质粒做进一步稳定转染。运用Westernblot技术检测稳定转染细胞株和阴性对照细胞株中hnRNPA2B1的蛋白表达水平并做定量分析。由MTT法检测细胞24h、48h和72h增殖情况。流式细胞仪(FCM)分析细胞周期分布和细胞凋亡率。结果通过使用RNAi技术,我们成功靶向抑制了hnRNPA2B1基因在mRNA和蛋白水平的表达,并成功建立稳定转染细胞株。这明显抑制了癌细胞72h的增殖率,增加细胞凋亡率,使细胞周期明显延长,并且使细胞阻滞于S期。经过统计分析,数据有统计学意义(P<0.05)。结论我们的研究结论表明, hnRNPA2B1基因在乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231的细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期过程起到关键作用。这为hnRNPA2B1基因的进一步研究提供基础。
其他文献
木质素是由三种不同的木质素单体聚合而成的,其含量和单体组成与植物体的综合利用密切相关。木质素单体的生物合成途径涉及到许多酶的参与,C3H/HCT是发现较晚的两个酶,在从对
交通仿真是交通分析的重要方法之一,在交通规划、交通控制中也起到了关键性的作用。本论文在分析了城市交通问题的基础上,回顾了交通仿真技术的发展历程、分析了城市交通微观
目的:构建携带白细胞介素24(Interleukin-24,IL-24)基因和抑瘤素M(OSM)基因的双基因共表达腺病毒载体(Ad-IL-24-OSM)并开展对A375人黑色素瘤细胞体内外抗肿瘤效应的实验研究。方法:在
公安领导者、领导班子在公安领导活动中处于主导地位和核心作用。要搞好公安工作,必须切实提高公安领导者的素质,加强领导班子建设。
<正>中华优秀传统文化,是人类社会长期积淀下来的思想、文化、精神的结晶,是民族精神的基石,也是构建儿童道德精神家园可资借鉴的丰厚资源。山东省济宁市是孔孟之乡,这里有浓
“数学活动经验”的实践与探索成为课改的一个重要内容之一,得到了很多专家学者的广泛关注。作为一线教师,将理论落实到课堂,从理解到实践,我们也正努力做着积极有益的探索,在实践
文章从五个层面对爱丽丝·沃克小说中的女性主义进行了解析,在对女性主题关注的基础上分析了沃克对两性关系的看法,沃克主张通过女性与女性的对话最终实现女性自我价值的构建
为满足国际安全管理规则(ISM)的要求,有的船公司仅仅以无事故管理为目的,各船公司的管理存在明显的分级,导致了租船人对各个船舶管理者的操作水平必须进行谨慎的评估。在这种
目的:比较超声引导下麦默通旋切活检术与超声引导下导丝定位手术切除乳腺隐匿性肿块(NPBL)的效果,为临床手术方法的选择提供依据。方法:回顾性分析362例行手术治疗的NPBL患者