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前言 磷脂是构成人体和所有动植物细胞膜及膜结构的主要成分。膜磷脂主要包括神经鞘磷脂(sphinyomylines, SM)、磷脂酰胆碱(phosphatidyl choline, PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphafidyl ethamlolamine, PE)、磷脂酰丝氨酸(phosphatidyl serine, PS)等。膜磷脂的各组分含量有一定比例,分布有一定规律。近年来,人们逐渐发现膜磷脂的组成和分布变化与多种疾病和细胞功能改变有关,因此日益引起学者的关注。 红细胞膜磷脂异常与机体的疾病状态有关。国内外学者报道很多疾病与红细胞膜磷脂异常有关,但有关脑梗死时红细胞膜磷脂变化的报道不多。脑梗死是一种血栓性疾病,在临床上较常见,并多发。该病在欧美国家发病率很高,近年来在我国也呈迅速增长趋势。随着生物化学和分子生物学的飞速发展,对血栓性疾病的研究无论是在理论或是临床应用均取得了巨大进步。但血栓形成机制尚未完全阐明,其发病机理和防治机制一直是医疗领域重要课题。对血栓的研究过去大多着眼于凝血过程和血小板功能,而血液中红细胞压积约占45%,其在血栓形成过程中所起的作用不可忽视,日益引起学者的重视。本试验采用病例对照方法检测脑梗死患者和健康人的红细胞膜总磷脂,磷脂各组分,膜胆固醇含量和血脂水平,探索红细胞膜脂质及血脂与脑梗死发生的关系。 实验材料 1.实验对象 病例组为42例脑梗死患者,来源于辽宁省人民医院神经内科住院病人,所有病例的诊断参照第四届脑血管病诊断标准,并经头部CT或磁共振显像证实。其中男性22例,女性20例,年龄45-75岁,平均年龄65.3岁。对照组40例来源于辽宁省人民医院门诊部体检的健康人员,其中男性20例,女性20例,年龄在45-75岁,平均年龄66.5岁。 以上研究对象均排除心血管疾病、糖尿病、肝、肾疾病等,且近期未服用过抗氧化药物和降血脂类药物。 2.标本采集 所有受试对象均在晨间空腹肘静脉采血4rnl注人含有肝素抗凝的试管中,标本收集后30ndn之内3000r/ndn离心10ndn,分离血浆置-70℃冰箱内保存待测。红细胞经 0.9%NaCI洗涤三次,取 0.5 ml压积红细胞于带帽试管中,封口膜封口后-70℃冰箱内保存待测。 实验方法 1.方法 采用薄层色谱分析法对红细胞膜磷脂各组分含量进行测定,并同时采用比色法检测红细胞膜总胆固醇(CHO)含量和膜总磷脂(TPL)含量。采用终点法测定血浆甘油三脂(T)和胆固醇*HO)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-CX免疫比浊法测定低密度脂蛋白胆固醇(LDL叶)含量。 2.主要仪器 生化分析仪,OLYMPUS AU1000,日本;紫外分光光度计,UV六65FW,日本岛津;薄层扫描仪,CS刁30,日本岛津。 3.统计学处理 结果以均数。标准差(k。s)表示,使用 Excel统计软件,两样本均数差异显著性用t检验评价。相关性采用直线相关分析,计算厂值;相关系数采用t检验评价。 ·2· 试验结果 1.两组间红细胞膜磷脂组撇膜TPL、膜CHO含量的比较:病例组与对照组比较,PC(0.60 i 0.09VS0.76 i 0.14llUndeL,p<0.of)、PE(0.68。0.04vs0.72 to.12rnmoZL,p<0.05)、TPL(2.39土0.*sva.56土o.12nuno*L,p<o.05)、**O(4.6二土o.1二v时.27土o.08mm*L,p<0.o二)、***/TP L(二.94土O.26vs二.54 t 0.23,p<0.of)、SM/PC(二.27。0.42vs0.91。0.22,p<0.01)有显著差异卢M虽然升高,但无统计学意义。 2.两组间血脂水平的比较:病例组与对照组相比,单位nunol/L:TG(.53 f 0.77ySI.24 t 0.47,p<0.05)、CHO(5.03。0.78V叨.30 to.63,p<0.of)、HDL一C(1.28 ic.18VSI.43 to.26,p<0.05,)、LDL-C(3.44t0.46VS2.sl。0.46,p<0.of)。 讨 论 实验结果表明病例组与对照组相比,病例组膜CHO含量明显增加;n工、PE和PC含量显著降低;CH O/O/ TPTPL、S M/M/PC分子比显著升高。提示病例组红细胞膜不仅存在胆固醇代谢障碍,同时也存在以PE、PC变化为主的膜磷脂组分代谢障碍。膜胆固醇增高对脑梗死形成的影响可能是膜胆固醇增加,RBC膜脆性增加*L含量减少与增加的膜胆固醇共同使红细胞变形能力下降,引起末端血流障碍和血管硬化;同时CHO/TPL、SM/PC是细胞老化指标,其比值增加说明脑梗死患者的RBC存在老化现象,红细胞生理功能降低,进一步影响末端血流而易于引起血栓形成。 病例组血浆胆固醇含量超过对照组上限的占40%,红细胞膜胆固醇含量超过对照组上限的占52%。红细胞膜胆固醇在脑梗死发病中的作用需进一步探讨。红细胞膜胆固醇含量与血浆胆固醇含量相关分析结果显示,两者无明显相关性。这提示膜胆固醇 ·3·与血浆胆固醇的交换机制出现异常,其具体机制需进一步探