修饰电极和纳米金阵列电极的制备和其在生物电化学中的应用

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本文概述了修饰电极、纳米阵列电极和其在免疫检测中的应用研究现状。制作1, 6-已二硫醇修饰电极(HDT/Au)、多壁碳纳米管修饰玻碳电极(MWNTs/GC)和金二维纳米圆盘电极(2DNEEs)电极,并对其性能进行表征。对辣根过氧化物酶催化(HRP)体系的各个影响因素进行优化,采用四种电极检测HRP的浓度,对几种电极的检测效果进行对比,得到适合该体系检测的工作电极。采用酶联免疫伏安法检测兔IgG抗原和黄曲霉毒素B1,达到了良好的检测效果。采用0.1 M的1, 6-已二硫醇作为修饰液,分别对直径为0.5 mm的金丝电极和3mm的金圆盘电极上进行化学自组装修饰。硫醇和金单质产生共价键和,依靠共价键和力化学吸附于金电极表面形成自组装膜。采用阻抗谱法和循环伏安法对修饰电极进行表征。研究结果表明,1,6-已二硫醇修饰层对铁氰化钾/亚铁氰化钾电子传递具有明显的阻碍作用,且随着修饰时间的增长而增加。采用0.1%Nafion-1 mg/mLMWNTs修饰液对玻碳电极进行修饰,阻抗谱和循环伏安法研究表征结果表明,碳纳米管修饰层对铁氰化钾/亚铁氰化钾电子传递具有促进作用。以径迹刻蚀聚碳酸酯滤膜为模板,化学沉积法制备金纳米线阵列,制备出长度为6μm、密度为(15)×108个/cm2、直径为100 nm、具有一定强度的连续的金纳米线阵列。采用循环伏安法和SEM对金纳米阵列电极进行了表征,研究结果显示,K3Fe(CN)6/ K4Fe(CN)6在电极表面的氧化还原反应受线性扩散控制。对辣根过氧化物酶催化H2O2氧化邻苯二胺酶催化体系进行了研究。确定了OPD-H2O2-HRP酶催化体系的最佳反应条件和参数。最终确定在温度为30℃,pH为5.0,OPD:H2O2为2.8,反应时间为1 h时。研究了OPD-H2O2-HRP酶催化体系的电化学反应特征。分别采用Au、HDT/Au、MWNTs/GC、2DNEEs为工作电极定量检测HRP。Au电极检测HRP的线性范围在6×10-11-2×10-9 g/mL,检测下限偏高。HDT/Au检测HRP的线性关系2×10-11-2×10-9 g/mL,检测下限可达1×10-11 g/mL。2DNEEs检测HRP的线性关系范围在2×10-11-5×10-10 g/mL,检测下限亦可达到1×10-11 g/mL。MWNTs/GC检测HRP的线性关系范围为1×10-125×10-10 g/mL。其中HDT/Au具有较好的结果。以OPD-H2O2-HRP酶催化体系为基础,采用酶联免疫伏安法对兔IgG和黄曲霉毒素B1进行定量检测。电化学测量体系采用微型三电极体系,工作电极为HDT/Au丝电极。研究结果表明兔IgG抗原线性范围为1×10-7-3×10-7g/mL,检测下限为5×10-8 g/mL。AFB1的线性范围为1×10-10-3×10-8 g/mL,检测下限为510-11 g/mL,即为0.05 ng/mL,比多数文献报道的检测低。
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