论文部分内容阅读
目的探讨肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages, AMs) Toll样受体2,4,9(TLR9)-髓样分化因子88(MyD88)信号通路在呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用。方法清洁级SD大鼠30只，按随机数字表法将大鼠分为3组，每组10只。A组保留自主呼作为对照；B组给予正常潮气量（VT8ml/kg）机械通气4h；C组给予大潮气量(VT40ml/kg)机械通气4h。机械通气结束时，取部分肺叶组织进行HE染色，光镜(×400)下观察肺组织病理学结果；电镜下观察大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)超微结构改变；测定肺组织湿/干质量(W/D)比值及支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、白细胞介素(IL-6、IL-1β)的浓度；蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)测定肺泡巨噬细胞TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、核转录因子—κΒ(NF-κΒ)的蛋白表达；实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺泡巨噬细胞TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ的mRNA表达。结果A、B组大鼠肺组织病理结构基本正常，C组大鼠肺组织有不同程度的损伤性改变；A、B组大鼠AECⅡ细胞超微结构基本正常；C组AECⅡ细胞核中的染色质、胞质内的板层小体、细胞膜以及微绒毛等均有不同程度的损伤性改变。与A组、B组比较，C组肺组织W/D比值(5.54±0.17比4.58±0.17、4.69±0.16)，BALF中总蛋白、IL-6、IL-1β的浓度(总蛋白：6.33±0.61比0.45±0.05、0.47±0.04；IL-6：1989.38±103.12比1032.61±61.15、1009.89±69.04；IL-1β：2.79±0.25比1.05±0.15、1.23±0.22)，肺泡巨噬细胞TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ的蛋白表达(TLR2：0.59±0.050比0.35±0.036、0.36±0.031；TLR4：0.84±0.040比0.40±0.026、0.40±0.020；TLR9：0.77±0.042比0.30±0.027、0.31±0.037；MyD88：0.95±0.091比0.56±0.082、0.58±0.084；NF-κΒ：1.02±0.076比0.74±0.052、0.70±0.076)均明显升高，差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。B组肺泡巨噬细胞TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ的mRNA表达分别是A组的1.08±0.21、1.05±0.20、1.06±0.18、1.03±0.18、1.04±0.26倍，差异均无统计学意义(均P＞0.05)；C组肺泡巨噬细胞TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ的mRNA表达分别是A组的4.98±0.85、5.16±0.78、9.31±0.82、4.42±0.44、5.63±0.72倍，差异有统计学意义(P＜0.01），差异均有统计学意义(均P＜0.01)；C组肺泡巨噬细胞TLR2、TLR4、TLR9、MyD88、NF-κΒ mRNA表达分别是B组的4.72±1.10、5.05±1.07、8.96±1.05、4.34±0.56、5.8±0.98倍，差异有统计学意义(P＜0.01）。结论肺泡巨噬细胞TLR2,4,9-MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤。