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目的:检测淋巴管内皮细胞标志物VEGFR3在肿瘤患者外周血单个核细胞来源的树突状细胞(Mo-DC)的表达情况;外源性给予VEGFR3的配体VEGF-C,检测VEGF-C/VEGFR3通路的激活对DC功能的影响,同时检测VEGF-C对DC表面TLR4表达量的影响,探讨VEGF-C/VEGFR3通路导致DC失能的分子机制。方法:取50例肿瘤患者的富集外周血,利用rh GM-CSF和rh IL-4共同诱导单个核细胞,得到树突状细胞,给予TLR4的特异激动剂LPS刺激DC成熟,流式细胞术检测DC表面VEGFR3的表达情况,免疫荧光方法验证VEGFR3在DC的表达;检测VEGF-C/VEGFR3通路对DC功能的影响:外源性给予VEGF-C,流式细胞术检测VEGF-C对DC表型的影响;MTT方法检测VEGF-C对DC刺激同种异体T淋巴细胞的影响;细胞计数方法检测VEGF-C对DC存活率的影响;ELISA方法检测VEGF-C对DC分泌细胞因子的影响;流式细胞术检测VEGF-C/VEGFR3信号通路对DC表面TLR4表达量的影响。结果:肿瘤患者Mo-DC表达淋巴管内皮细胞标志物VEGFR3:未成熟DC表面VEGFR3CD11c的表达率为(8.52±4.04)%,成熟后VEGFR3CD11c的表达率为(18.56±5.25)%,差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光也显示:树突状细胞表达VEGFR3受体,其胞浆和胞膜显著着色,并且LPS刺激后的阳性细胞数明显多于空白对照组。VEGF-C能降低DC刺激T淋巴细胞增殖的能力:LPS组的刺激指数(SI)为3.22±0.33,LPS+VEGF-C组的SI为1.57±0.38,较LPS组显著下降(P<0.05),说明VEGF-C以某种方式抑制由LPS引起的DC功能的上调。VEGF-C能降低DC细胞的存活率;此外,VEGF-C/VEGFR3通路能降低DC上清中IL-6、TNF-α、IL-12等细胞因子的分泌:LPS刺激后,DC上清中的IL-6、TNF-α和IL-12的分泌量明显升高,IL-6由(44.73±34.02)pg/ml升高为(350.32±53.84)pg/ml;TNF-α由(25.36±24.61)pg/ml升高为(613.57±101.35)pg/ml;IL-12由(41.97±8.02)pg/ml增加为(233.97±108.36)pg/ml,而向LPS组继续加入VEGF-C能降低DC细胞因子的分泌:VEGF-C+LPS组中IL-6的分泌量降低为(147.41±27.28)pg/ml;TNF-α的分泌量降低为(244.13±36.20)pg/ml;IL-12的分泌量降低为(100.65±18.96)pg/ml,和LPS组比,差异有统计学意义(P<0.05)。但是VEGF-C对DC表面CD80、CD83、CD11c和HLA-DR的表达无影响(P>0.05)。VEGF-C能降低DC表面TLR4的表达:TLR4在阴性对照组的表达率为(2.50±2.61)%;LPS刺激使TLR4表达上调,其表达率为(14.10±4.75)%,差异有统计学意义(P<0.05);但加入LPS的同时外源性给予VEGF-C能导致TLR4的表达下调,其表达率为由降低为(5.08±3.22)%,差异有统计学意义(P<0.05),提示VEGF-C/VEGFR3信号通路可能通过降低DC表面TLR4的表达负反馈抑制DC细胞功能,对DC起负向免疫调控作用。结论:肿瘤患者Mo-DC表达淋巴管内皮细胞标志物VEGFR3;VEGF-C/VEGFR3通路能抑制由LPS引起的DC免疫功能的上调,这一功能可能是通过降低DC表面TLR4的表达实现的,进而对DC起负向免疫调控作用,但其分子机制尚需进一步的研究证实。