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背景：糖尿病的发病率正在逐年增加,而在终末期肾功能衰竭的患者中,糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)所占的比例也已增至15%。DN是糖尿病主要并发症之一,发病机制及其复杂,晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)为其之一,目前研究较多。DN病理特征包括胞外基质(extracellular matrix, ECM)增多,肾小球基底膜(glomerular basement menbrane, GBM)增厚等。在DN的病理生理过程中,肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells, GMC)最为活跃。钙离子为第二信使,参与很多生物学作用,包括GMC收缩,分泌功能,增生及凋亡等。已有报道GMC增生时往往伴有系膜细胞膜离子通道启闭的改变,进一步研究GMC膜离子通道特性,对从离子通道角度寻找防治糖尿病肾病具有重要意义。瞬时受体势(transient receptor potential, TRP)是一种新发现的细胞膜上的阳离子通道,主要通过的为Ca2+,瞬时受体势C(transient receptor potential canonical, TRPC)是TRP家族主要成员之一。目前研究表明TRPC6与肾脏疾病有关,主要是在足细胞方面,与家族性局灶性节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis, FSGS),蛋白尿等密切相关，与DN的研究较少见。转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)是一种多功能,具有多向调节功能的生长因子,介导了DN肾小球肥大和硬化。本课题研究AGEs是否影响GMCTRPC6的表达及其与TGF-β1的关系。目的：观察AGEs对体外培养的大鼠GMC TRPC6表达的影响,及其与TGF-β1的关系,进一步探讨AGEs在糖尿病肾病中的发病机制。方法：原代培养大鼠肾小球系膜细胞,3代后GMC分为实验组AGE-BSA组和对照组BSA组,刺激24小时,收集细胞,提取蛋白质,应用免疫印迹和免疫荧光技术检测TRPC6的表达；同样3代后GMC实验组予TGF-β1(10ng／ml)处理,设阴性对照,免疫印迹,RT-PCR和免疫荧光技术检测TRPC6的表达。结果：1.免疫荧光显示GMC表达TRPC6,以细胞膜表达为主。2.不同剂量AGE-BSA,BSA对GMC TRPC6蛋白表达的影响：BSA处理组不同浓度组比较,无统计学意义(p>0.05)；AGE-BSA处理组TRPC6表达水平随浓度升高逐渐下降,有统计学意义(p<0.05),且呈剂量依赖性。3.与BSA处理组相比,免疫荧光显示AGE-BSA处理组TRPC6蛋白表达减少。4.与正常组相比,TGF-β1处理组TRPC6核酸和蛋白表达水平下降(p<0.05)。5.与正常组相比,免疫荧光显示TGF-β1处理组TRPC6蛋白表达减少。结论：GMC表达TRPC6,以细胞膜表达为主；AGEs诱导GMC TRPC6表达下调,TGF-β1引起GMC TRPC6表达减少,AGEs又能诱导GMC TGF-β1表达上调,提示AGEs可能部分通过TGF-β1途径引起TRPC6表达减少。