生防菌组合应用对黄瓜根结线虫病的防治效果及生防菌的相容性

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为了提高生防菌的防病效果及其稳定性,本研究以黄瓜根结线虫病为靶标病害,将具有不同作用方式的生防菌淡紫紫孢菌YES、粉红螺旋聚孢霉67-1和枯草芽孢杆菌B006进行组合测定在不同剂型和应用技术下,各组合的温室和田间防效,并根据blissing independence模型分析生防菌间的相容性。平皿对峙和黄瓜根际存活数量测定表明,淡紫紫孢菌YES与粉红螺旋聚孢霉67-1无拮抗作用。B006在PDA和黄瓜根分泌物培养基上对YES和67-1的生长有拮抗作用,但在黄瓜根际未表现明显拮抗作用。通过测定生防菌株对根结线虫的卵寄生性及二龄幼虫的致死率,确定YES孢子(2×106孢子/mL)对根结线虫的卵寄生作用(51.0%)高于67-1(44.0%);而B006和67-1无菌代谢产物48h后对根结线虫二龄幼虫J2的致死率达100%。将对根结线虫具有生防作用的生防菌混和使用评价主要作用机理不同的生防菌在温室和田间的防效。土壤中二龄幼虫J2接种量为1000条/100g土时,将生防菌粉剂加入育苗基质中(终浓度为106cfu/g基质)并在移栽时拌入生防菌(106cfu/g),菌剂YES、67-1、YES+67-1以及B006+YES处理的防治效果接近,在20~30%左右。田间试验表明土壤中根结线虫卵密度不同,各生防菌组合的防病效果也不同。土壤中线虫卵密度为398个/100g干土时,YES+67-1粉剂混和使用可显著抑制根结的形成,防效为63.7%,显著高于两菌剂YES和67-1单独使用的防效33.0%和41.3%;根据blissing independence模型分析,YES与67-1间表现为累加效应。卵密度为998个/100g干土时,B006+YES组合与YES对根结线虫的防治效果分别为45.1%和44.0%;卵密度为1285个/100g干土时,B006和67-1组合对根结线虫病的防效仅为14.0%。为了进一步提高防效,改变生防菌的剂型和施用方式,并进行温室和田间防效评价。移栽前15d用终浓度为107cfu/g的生防菌液体菌剂处理含线虫卵的土壤(125个/100g土),并在移栽时浇灌20mL液体菌剂,可使YES和YES+67-1组合的温室防治效果分别提高到83.2%和78.4%。田间试验表明,淡紫紫孢菌YES与粉红螺旋聚孢霉67-1液体菌剂混和处理推迟线虫的侵染时间,YES与67-1组合的防效比单一菌剂稳定。体外测定了B006无菌代谢产物对YES和67-1几丁质酶产生和降解作用的影响,结果表明,菌株B006无菌发酵滤液加入诱导两真菌产生几丁质酶的培养液后,可明显抑制YES和67-1产几丁质酶的能力,24h的抑制率分别达到100%和72%。B006无菌发酵滤液还可抑制67-1菌丝的生长并加速67-1几丁质酶的降解,降解速率达到51.4%。综上所述,本研究利用主要作用机理不同的生防菌YES和67-1粉剂混和使用可以延缓根结线虫的侵染,提高防病效果。但土壤中线虫虫态、菌剂使用技术等影响依据blissing independence模型判定生防菌之间的相容性。该结果对杀线虫复合生防菌剂的研制及使用技术改进具借鉴意义。
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