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背景:近年来乙型肝炎病毒(HBV)的X基因对肝细胞凋亡的影响以及其与肝细胞癌变的关系越来越受重视,目前已发现HBx可以通过多种途径影响肝细胞凋亡,但其具体机制不明。凋亡抑制蛋白家族成员XIAP作为重要的调亡抑制蛋白在细胞的调亡过程中发挥着重要作用,本研究探讨XIAP在HBx影响肝细胞调亡和癌变过程中的作用。目的:研究HBx基因在肝癌细胞系HepG2及正常肝细胞系L02中的表达对细胞凋亡的影响以及与凋亡抑制蛋白XIAP在细胞中表达的相关性。方法:1.复苏及培养HepG2细胞和L02细胞系;2.构建pcDNA3.1-HBx质粒并分别瞬时转染HepG2细胞和L02细胞系;3. RT-PCR检测HBx基因在转染细胞中表达;4. Realtime荧光定量PCR检测XIAP基因在转染前后表达量的差异;5.免疫细胞化学方法检测XIAP蛋白在转染前后蛋白表达位置及差异;6.流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:1. HBx基因在L02/pcDNA3.1-HBx及HepG2/pcDNA3.1-HBx细胞中均有表达,证明转染成功;2. L02/pcDNA3.1-HBx细胞形态改变,由圆形变成梭形,类似于HepG2细胞系;3. L02/pcDNA3.1-HBx细胞中XIAP基因表达量低于L02细胞(P<0.01);HepG2/pcDNA3.1-HBx细胞中XIAP基因表达量高于HepG2细胞(P<0.01);4. L02/pcDNA3.1-HBx细胞中XIAP蛋白表达较未转染HBx基因L02细胞少(P<0.05);HepG2/pcDNA3.1-HBx细胞中XIAP蛋白表达较未转染HBx基因HepG2细胞多(P<0.01);5. L02/pcDNA3.1-HBx细胞凋亡率较L02/pcDNA3.1细胞升高(P<0.01);HepG2/pcDNA3.1-HBx细胞凋亡率较HepG2/pcDNA3.1细胞略下降(p<0.05)。结论:HBx基因可以促进正常肝细胞的细胞凋亡,抑制肝癌细胞的细胞凋亡。此作用机制之一可能是通过调控凋亡抑制蛋白XIAP的表达来实现的。