肺癌患者中miRNA转录水平变化及其运用CT-PRFA方法治疗探究

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背景:肺癌居死亡原因世界范围内第一位,其发病率占男性癌症患者的18.4%,占女性的21.9%。相关数据显示,超过90万例患者每年死于肺癌。到目前为止,还没有发现这种致命的疾病的有效诊断和预测风险的生物标记物。在过去十年的科学研究进展中,越来越多的研究指向microRNAs (miRNAs or miRs)在参与各种类型的肺部恶性肿瘤中的重要作用,发挥的角色包括促发因子、调节因子、衡量危险分层的分子、作为诊断的生化标志物等。目前已有研究证实了miR126,let-7, miR-372, miR-182*,以及miR-220这5个miRNA与总体生存率显著相关,而且miR126是保护性的miRNA因子,细胞周期蛋白cyclinD的表达水平受miR126的调控。临床治疗方面,CT引导下肿瘤射频消融术(CT-PRFA)是一种用于治疗原发性及继发性肿瘤的微创技术,但目前尚未有研究探究肺癌射频消融术术前以及术后的miRNA的表达水平的变化,在非小细胞肺癌和肺转移性肝癌患者中miRNA表达水平的差别,及其与细胞周期蛋白cyclinD表达水平的关系,以及相关miRNA的表达水平与患者预后的关系。目的:本课题的研究目的是1.探讨CT-射频消融术治疗肺癌对主要研究终点的功效和对中期生存的评价的影响。2.CT-射频治疗肺癌前后miRNA表达水平的变化。3.miR-126与miR200c在非小细胞肺癌以及肺转移性肝癌中的表达的比较。4.miR-126与miR200c的表达水平在非小细胞肺癌以及肺转移性肝癌患者中对生存率的影响。5.miR-126与miR200c的表达水平在非小细胞肺癌以及肺转移性肝癌病灶组织中与细胞周期蛋白cyclin D的关系。6.cox比例风险回归模型分析非小细胞肺癌以及肺转移性肝癌病的预后因子。方法:本研究入选了从2009年1月到2013年10月,根据WHO诊断标准,经过病理显微镜镜检诊断为非小细胞肺癌,或者肺转移性肝癌,且纳入CT-PRFA治疗的患者26名。进行CT引导下肿瘤射频消融术,定量实时PCR (QRT-PCR)方法测定术前以及术后microRNA表达水平,实时PCR系统进行定量分析。采用细胞免疫组化的方法测定肿瘤组织中细胞周期蛋白cyclinD的表达。随访截止时间为2014年6月。使用两种独立样本t检验或单因素方差分析评估miRNA的表达水平与临床参数之间的可能关系。我们采用kaplan-Meier法比较生存率,风险比(HR)和95%可信区间(CI)研究患者射频消融术后生存率。生存功能比较通过使用Log Rank对数秩检验进行,P<0.05为有显著差异。用Cox比例风险模型进行多变量分析预测非小细胞肺癌与肺转移性肝癌的预后因子。结果:14例经病理确诊的原发性非小细胞肺癌(NSCLC)和12例肝细胞癌肺转移患者入选本研究。所有14例的原发性非小细胞肺癌患者只有一个单独的病灶,9例肝细胞癌肺转移患者在肺部只有一个单独病灶,而其他三例则有两处肿瘤病灶。中位随访时间为15个月(3-34个月的范围),没有患者失访。在随访过程中只有一位患者接受了全身系统化疗,用以辅助射频消融术治疗,而其他患者则没有接受任何抗肿瘤的治疗。患者总体2年生存率为80.8%(95%CI:35%,95%)。结果显示以miRNA126分两组,在继发性肺癌患者中kaplan meier生存分析显示,低ACt组与高ACt组的生存率没有显著差异(p=0.497);而在原发性肺癌中miRNA126高ACt组的生存率明显高于低ACt组(p=0.033)。以miRNA200c分两组,在继发性肺癌患者低ACt组的生存率明显高于高ACt组(p--0.037)而在原发性肺癌中miRNA200c,低ACt组与高ACt组的生存率没有显著差异,(p=0.09)。CT-PRFA是一种有潜在价值的有效的治疗方案,既可应用于高选择性的孤立原发非小细胞肺癌,也可以用来治疗肝癌继发肺部肿瘤。CT-PRFA的功效可能与miRNA的表达上调或下降有关,miR-126的表达水平与非小细胞肺癌患者的生存率显著相关,且与细胞周期蛋白cyclin D的表达成反比关系,cox风险比例回归模型分析得出miR126的表达水平是非小细胞肺癌患者的预后因子。结论:CT-PRFA是一种有潜在价值的有效的治疗方案,既可应用于高选择性的孤立原发非小细胞肺癌,也可以用来治疗肝癌继发肺部肿瘤。CT-PRFA的功效可能与miRNA的表达上调或下降有关,miR-126的表达水平与非小细胞肺癌患者的生存率显著相关,且与细胞周期蛋白cyclin D的表达成反比关系。
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