【摘 要】
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本论文利用上海来益生物药物研发中心的植物内生菌资源,通过特定抗肿瘤细胞A549、LoVo模型和抗菌模型的筛选,获得多株活性功能菌株,对其中一株CPCC 480171进行了菌种鉴定,并对其
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本论文利用上海来益生物药物研发中心的植物内生菌资源,通过特定抗肿瘤细胞A549、LoVo模型和抗菌模型的筛选,获得多株活性功能菌株,对其中一株CPCC 480171进行了菌种鉴定,并对其次级代谢产物进行分离纯化和结构鉴定研究。
利用传统分类学方法、18S rDNA和ITS序列的测定以及系统发育分析对CPCC 480171进行分类鉴定,为链格孢霉属。
对菌株CPCC 480171的代谢产物进行研究,主要应用了溶媒萃取、硅胶柱分离、中压层析、凝胶LH20、和HPLC制备等多种分离纯化手段,分离纯化得到6个代谢产物,标记为HCCB01778zl-6。利用质谱和核磁共振手段对这些产物进行了结构鉴定,确认HCCB0177821为6,8-二甲基-四氮奈-2,4(3H,10H)二酮,分子量为242;HCCB01778z2为4’,7-二羟基异黄酮,分子量为254,对A549、LoVo细胞具有较强的抑制作用;HCCB01778z3为4’,5,7-三羟基异黄酮,分子量为270,对A549、LoVo细胞均具有很强的抑制作用,目前4’,5,7-三羟基异黄酮已经开发作为药物;HCCB01778z4为链格孢毒素(Altertoxin-I),分子量为352,具有较强的诱变作用和一定的抑制血小板聚集的作用;HCCBOl778z5(新化合物),与HCCB01778z4为同分异构体,分子量为352,其绝对构型和药理活性有待进一步研究;HCCB01778z6的分子量为317。
通过培养基的优化,提高了活性产物HCCB01778z4的产量;然后利用高速逆流色谱(HSCCC)的方法,从发酵液中一步成功分离得到活性产物HCCB01778z4,纯度高达95%。
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