人类免疫缺陷病毒是艾滋病的元凶,病毒编码蛋白Tat在HIV-1的潜伏与激活中发挥着类似于“开关”的功能。以Tat调控功能为核心的研究对于HIV-1基因转录延伸机制的揭示以及开发艾滋病治疗的靶点新药物具有重要意义。雷公藤甲素(triptolide,TPL)作为一个著名的中草药成分,已经被用来治疗包括自身免疫病、癌症等在内的多种疾病,近来人们发现其在HIV-1方面的作用,本研究致力于揭示其引起Tat降解的机制,该机制研究将极大推进TPL在艾滋病方面的治疗。研究基于HIV-1转录细胞模型,对多个雷公藤来源活性成分进行筛选,发现TPL以时间、浓度依赖性抑制HIV-1的转录,并且TPL可以特异性引起HIV-1编码蛋白Tat的降解继而抑制HIV-1的转录。研究显示TPL不是通过阻断CycT1对于Tat的保护作用,也不是在转录、翻译水平影响Tat的含量,而是通过泛素蛋白酶体降解途径促进了 Tat的降解。为了寻找在该过程中起作用的E3泛素连接酶,运用亲和纯化、质谱、SILAC(稳定同位素标记氨基酸细胞培养)蛋白组学定量技术对Tat相互作用蛋白进行定量分析,共鉴定出1234种蛋白,其中包括12个E3泛素连接酶。需要指出的是,CUL4B不是在TPL处理时而是天然条件下引起Tat降解的E3泛素连接酶,而且TPL不是通过单一位点的泛素化引起Tat的降解。